Проект “Всероссийский Аптекарский Огород”. Итоги. Ноябрь 2022г

Всероссийский Аптекарский Огород. Итоги работы.

Ноябрь 2022 год.

История вопроса.

Весной этого года стартовал проект, целью которого является создание отчественной базы для нужд гомеопатии. Инициатором проекта выступило руководство ОО «Российское Гомеопатическое Общество». Работой над проектом и его реализацией занимается НП «Научный Центр Технологий Устойчивого Развития «Любинка». Это совместный проект. 

Ниже описаны результаты проделанной работы, текущая ситуация и планы на 2023 год.

  1. Сбор заказов от производителей лекарственных гомеопатических препаратов на 2023 год.

Продолжается сбор списков, заказов на выращивание растений от Заказчиков. Есть договореность, что в ноябре все списки будут у нас. Список от ООО «ОЛЛО» в работе.

2. Подготовка к следующему сезону 2023 года. Оргработа.

2.1. Работа с Заказчиками сырья. Идет обрабока списка растений от ООО « ОЛЛО», список солидный. Растения разложены по группам:

Травы, однолетники, двухлетники, многолетники.

Кустарники,

Деревья,

Лианы.

2. Расширение территории проекта.

2.2.1 Проект «Окская Пойма»: работа по включению новых участков продолжается. Очень перспективная площадка на территории экопарка «Ясно Поле» на севере Тульской области. Участок отвечает всем требованиям: наличие приемов органического земледелия, улучшение качества почвы за счет переработки органических остатков и навоза, наличие специалиста агронома, есть опыт выращивания лекарственных трав, заложен свой аптекарский огород.

2.2.2 По Ленобласти и по Тюменской области ведутся переговоры о создании региональных площадок. В Тюменской области есть хороший питомник лекарственных растений. Прошли переговоры с хозяином питомника.

2.3. По качественной идентификации видовой принадлежности растений. Необходимо задействовать потенциал ботанических садов. На сегодняшний момент есть контакты:

2.3.1. Ботанический сад биофака МГУ. Зам директора бс Александр Витальевич Раппопорт. Подписан протокол о совместной деятельности.

2.3.2 ВИЛАР. Москва. Андрей Николаевич Цецилин. сегодня заведует Ботаническим садом института и преподает в Тимирязевской аеадемии. Есть предварительная договоренность о своместной работе.

2.3.3. Санкт-Петербург. Зам. Директора ботсада им. Петра Великого, Юрий Гурьянович Калугин. Есть рабочие контакты

2.3.4. Томский ботанический сад. Начата работа по налаживанию рабочих контактов.

2.4. По отбору надежных поставщиков качественного посадочного материала. Начали готовить список питомников, и травников физлиц. Есть координаты надежного питомка в Томске.

3. Информационная поддержка проекта.

Поставлена цель: просвещение населения, привлечение новых участников, расширение территории проекта, создание региональных отделений.

Есть несколько групп на телеграмм:

Аптекарский огород. Форум. Открытая группа https://t.me/aptekarskyi_ogorod

Аптекарский огород. Орггруппа. Закрытая группа.

Начата работа над созданием сайта проекта. Выделено доменное имя www.a.lubinka.ru начата работа по проектированию главной страницы и меню сайта. Запуск сайта в этом году. Нужно профинансировать работу программиста.

4. Подготвка к международному конгрессу по гомеопатии. Направления работы в 2023году.

Есть решение руководства РКО о формировании секции «Всероссийский Аптекарский Огород» под руководством к.б.н. А.Н. Метелкина.

Сформированы основные направления работы секции, есть информация в сети, идет работа по приглашению участников.

На секции будут заслушаны доклады по направлениям, которые и будут развиваться в 2023м году.

5.Основные направления развития проекта на 2023 год.

Вопросы организации аптекарских огородов в регионах.

Юридическое оформление. Формы договоров между Заказчиком и Исполнителем.

Участники проекта. Исполнители, Заказчики, ботсады, питомники, травники, активисты развития сельских территорий, экологи, представители госорганов, бизнесмены, ученые и практики.

Социальная значимость для развития сельских территорий. Привлечение горожан живущих на сельских территориях, привлечение к работе успешных проектов.

Роль ботанических садов в проекте. Видовая идентификация  растительного сырья. Развитие базы данных по ботсадам. Привлечение сотрудников ботсадов к работе.

Органическое земледелие, это качество продукции и отсутствие токсинов. Школа органического земледелия. Переработка органических отходов, повышение плодородия почвы.

Современные технологии выращивания лекарственых растений. Есть идея строительства зимней теплицы, как типового проекта для его последующего тиражирования. Вермитехнологии обогащения почвы, качественное выращивание рассады. Фитошкаф, световые технологии.

Логистика. Решение задачи доставки семян, для посадки растений, передачи продукции заказчикам.

Экономика. Вопросы соотношения трудовых затрат и побучения прибыли. Выбор сегмента, кому это может быть интересно: любителям выращивания цветов, горожанам дачникам, питомникам.

Образовательный аспект. Курсы по ограническому земледелию, по лекарственным травам, по темам развития сельских территорий.

Партнеры. Ботсады, государственные и частные, питомники, специалисты ботаники, практики травники. Бизнес и госструктуры. Экологи.

Сельская кооперация. Вопросы кооперации сейчас у всех на слуху. Попробуем и тут, оценим свои возможности.

Руководитель проекта «Всероссийский Аптекарский Огород», к.б.н. А.Н. Метелкин.

Ноябрь 2022.

 

Международный конгресс по гомеопатии. Секция “Всероссийский Аптекарский Огород. Начало”.

Объявление

27-28 января 2023 года состоится XXXIII международный гомеопатический конгресс

«Развитие гомеопатического метода в современной медицине»

Сайт мероприятия https://medinhom.ru/

Справки по телефону +7 (495) 672-26-87 почта info@medinhom.ru 

 

                 Президент Российского Гомеопатического Общества, Леонид Владимирович Космодемьянский предложил на конгрессе провести секцию по тематике аптекарского огорода.

Цель проведения секции: личное знакомство участников проекта, приглашение желающих принять участие в работе, обсуждение основных аспектов работы. Планируется он лайн участие и запись мероприятия. Точная дата и время проведения будут уточнятся.

Наш анонс.

Междисциплинарная секция

“Всероссийский Аптекарский Огород. Начало”

           Наш проект объединяет неравнодушных людей. Неравнодушных к охране природы, к собственному здоровью, к развитию сельских территорий. Мы приглашаем опытных огородников, ученых ботаников, агрономов, активистов, любителей травников.

                Аптекарский огород на грядках органического земледелия, это новая форма хозяйствования на земле. Она требует не только навыков по органическому земледелию ( наш консультант, агоном и писатель Ник Курдюмов. Его книги не один десяток лет пользуются колоссальным спросом, он открыт к диалогу, отвечает на вопросы ) но,  и умение выращивать лекарственные травы. Фармакопейный список лекарственных трав для гомеопатии содержит сотни и сотни наименований, и всем известных, таких как крапива двудомная, крапива жгучая, крапива глухая, но и очень редких.

              Мы приглашаем в приключение: мы начали поиски арники горной, королевы лекарственных трав, ищем её в Белоруссии и на Кавказе. Подключайтесь к поискам!

У нас уже есть экспериментальная площадка «Окская Пойма» https://lubinka.ru/rossia-aptek-ogorod-2022-2023-7/ , где созданы основы для работы и накоплен значительный опыт выращивания редких и исчезающих видов растений. Наши заказчики, это гомеопатические фирмы с многолетним опытом работы, наши консультанты, это ученые из ботанических садов России. Мы открываем сайт, посвященный нашему проекту.

План участка N 1. «Окская Пойма», это социальный проект, объединяющий несколько хозяев огородников, знакомых с приемами органического земледелия, любителями выращивания полезных трав.

Примерный перечень направлений секции.

Презентация проекта. Цели и задачи.

Вопросы организации аптекарских огородов в регионах.

Юридическое оформление.

Участники проекта.

Социальная значимость для развития сельских территорий.

Роль ботанических садов в проекте. Видовая идентификация  растительного сырья.

Органическое земледелие, отсутствие токсинов.

Современные технологии выращивания лекарственых растений.

Логистика.

Экономика.

Образовательный аспект.

Партнеры.

Сельская кооперация.

Приветствуются предложения, вопросы, инновации. Нам нужны активные участники с собственными проектами.

Руководитель секции, к.б.н., Александр Метелкин

Наш форум для обсуждения на телеграмм

https://t.me/aptekarskyi_ogorod 

Присылайте на форум Ваши вопросы, ждем!

 

Всероссийский Аптекарский Огород. 2022 – 2023. 7 ноября 2022г

                                                                                                                                       ВСЕРОССИЙСКИЙ АПТЕКАРСКИЙ ОГОРОД. 22/23.

Российское гомеопатическое общество (РГО), г. Москва

РГО – является общественным объединением, в состав которого входят производители, изготовители (аптеки) гомеопатических лекарственных средств, врачи. www.rusmedhom.ru

НП «Научный Центр Технологий Устойчивого Развития «Любинка», Московская область. www.lubinka.ru научный центр, накопивший опыт выращивания лекарственных растений, имеет контакты с ботаническими садами Москвы и Санкт-Петербурга.

Аптекарский огород «Окская пойма». Участок № 1. Описание на ноябрь 2022 г.

План территории усадьбы.

Рис. 1. План усадьбы. Желтым цветом выделены грядки аптекарского огорода, встроенные в природосообразную территорию

На Рис. 1 план биосферной усадьбы: постройки, лесные и плодовые деревья, кустарники, огород органического земледелия, питомник краснокнижных растений Московской области из коллекции ботсада биофака МГУ (протокол о намерениях), аптекарский огород «Окская пойма», участок № 1.

Усадьба заложена в 1991 году на старой пустоши, часть деревни сгорела в 1907 году. Полное отсутствие химических удобрений, экологически чистая почва. Объединение лесного массива, сада, ягодников и грядок органического земледелия. Применение современных приемов органического землепользования: вермитехнологии и светокультура для выращивания рассады, плоскорез Фокина, мульчирование почвы, сидераты, капельный полив, ветрозащита, формирование микроклиматических зон.

Начало проекта. 2022 год.

В этом году мы протестировали работу с двумя известными гомеопатическими фирмами: ООО ” Доктор Н” ( https://doctor-n.ru/ ) и ООО “ОЛЛО” ( http://ollo.norna.ru/ ) . Эти две старейшие в России организации, производители лекарственных препаратов для гомеопатии, приобрели растения в нашем питомнике, который создан на основе коллекции редких видов растений ботанического сада биофака МГУ им. М.В.Ломоносова, г. Москва. На этом примере мы отработали комплект документов для оплаты растений на основе договора с физлицом. Пакет документов имеется. Оформили паспорта растений. Провели работы в сертифицированной лаборатории по оценке качества растений, получили положительное заключение.

Таблица № 1. Перечень лекарственных растений. 2022г

Наименование

участка

Латинское название

Русское название

Количество

растений

Откуда взят.

Дата высадки

Назначение

Красная Книга

1

Gratiola officinalis

Авран аптечный

~100

БС Биофака

МГУ

2004

Размножение. Сбыт.

Красная Книга

2

Clematis recta

Ломонос прямой

~50

БС Биофака

МГУ

2004

Размножение. Сбыт

Берег реки. Усадьба.

3

Lámium álbum

Ясно́тка бе́лая

 

Усадьба, дикорос

Дикорос

Уход. Сбор. Сбыт

Берег реки

4

Urtica dioica L.

Крапива двудомная

 

Пойма реки. Дикорос

Дикорос

Уход. Сбор. Сбыт

Усадьба

5

Leonurus cardiaca L.

Пустырник сердечный

 

Усадьба, дикорос

Дикорос.

Уход. Сбор. Сбыт

Усадьба

6

Sambucus nigra

Бузина черная.

~

Местный вид.

1998

Размножение. Сбыт.

 

7

Avena sativa

Овес посевной

 

Магазин.

«Сад-Огород»

2022

Сбыт

А/О. Участок

8

Echinácea purpúrea

Эхинацея пурпурная

~10

ООО «Доктор Н»

2022

Размножение.

А/О. Участок.

9

ehinops spaerosehyflium

actic glow

Эхинопс. Мордовник

~5

ООО «Доктор Н»

2022

Размножение.

А/О. Участок

10

Hamamélis virginiána

Гамамелис Виргинский

81 шт., рассада

 

2022

Размножение.

Каштан

11

Aésculus

Каштан конский

1

ООО «Доктор Н»

2022

Выращивание.

Планы развития на 2023 год. Две задачи.

Задача 1.

Создание базового аптекарского огорода «Окская пойма» на черноземах Окской поймы. Аптекарский огород может развивать территорию для посадки на других участках, предварительная договоренность с владельцами имеется.

Проект имеет следующие преимущества:

1. Есть коллекция краснокнижных, лекарственных растений из ботсада биофака МГУ.

2. Есть договор о сотрудничестве с этим ботсадом.

3. Черноземы, отсутствие удобрений, опыт органического земледелия.

4. Максимальное биоразнообразие растений по Московскй области, граница лесостепи.

5. Есть рабочие контакты с ООО “ОЛЛО” ООО “Доктор Н”.

6. Близость к Москве, возможность забора материала с оценкой его качества.

Задача 2.

Будем вести поиск редких видов растений в других регионах. Расширять количество участников проекта “Аптекарский огород”

Отбор будет идти по двум направлениям:

  1. Знание приемов органического земледелия.
  2. Опыт выращивания лекарственных растений.

И, обязательно, подтверждение верности вида растения. Паспорт растения, это основной документ.

Ведутся переговоры по созданию региональных отделений в Ярославской, Тюменской и Ленинградских областях.

Заказы для Краснодарского края.

Наши ближайшие задачи на зиму 22/23гг:

1. Создание перечня растений, базовых, основных, которые в первую очередь нужны.

2. Анализ списков от Заказчиков, по таксонам, травы, многолетние, однолетние, кустарники, деревья.

Нужно оценить, возможности выращивания редких видов, раз, определить сколько можно брать материала у многолетников без потери их жизнеспособности. По травам мне известно правило, срезать только верхнюю треть растений. По корневищам, понятно, что утеря будет безвозвратной.

3. Согласование с руководством ботсада Биофака МГУ, по оценке видовой принадлежности выращиваемых растений. Заложить в цену заказа. Так же в Босду наверняка есть нужные нам лекарственные растения!

4. Задача оценки качества растительного сырья раскладывается на два плеча, Исполнитель выделяет часть материала Закзчику на анализ, Закзчик оплачивает этот материал и проводит анализ на наличие токсинов согласно законодательству РФ.

5. Мое пожелание, выделить возможности и средства для оценки качества сырья по наличию в них ПОЛЕЗНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ.

6.Важно 1!

Однозначно против сборов дикоросов, это преступление, поскольку сборы ведутся до полного уничтожения популяции, контроль невозможен, большое количество лек. растений внесены в Красную Книгу, так же есть риски присутствия тяжелых металлов.

Важно 2.

Важна помощь и поддержка Заказчиков нашему проекту “Аптекарский огород”. Инициатива приветствуется.

Есть положительный опыт ООО “Доктор Н”, сотрудники этой организации не только сделали первый заказ, приехали собрали, НО (!), сами несколько раз приезжали и сажали свои саженцы.

По нашему огороду “Окская пойма”.

С землей проблем нет.

Привозите саженцы, присылайте семена растений, которые вам нужны. Будем высаживать.

Вместе легче и быстрее запустить проект.

Требования к оформлению материалов:

1) Ботанический паспорт растения.

2) Письмо от организации Производителя сырья или физлица, подтверждающее, что растение не обрабатывались пестицидами и др. при выращивании, выращенных при использовании органических удобрений, в экологически-чистых районах,

3) Контроль качества растительного сырья в лаборатории Роспотребнадзора, должен отдельно оплачиваться Заказчиком, который закупает сырье.

Наши публикации по теме.

2022г. Список растений: https://disk.yandex.ru/i/_2cbnlfMf6ZWaw

Аптекарские огороды и лекарственное сырьё. 22 06 2022 https://lubinka.ru/lek_rast-22-06-2022/

Аптекарский огород. 18.08.2023 https://lubinka.ru/aptekarsky_-ogorog-18-08-2023/

Всероссийский проект “Аптекарский огород” https://rusmedhom.ru/novosti/article_post/vserossijskij-proekt-aptekarskij-ogorod

Контакты:

Аптекарский огород. Форум. https://t.me/aptekarskyi_ogorod

Руководитель проекта «Аптекарский огород» А.Н.Метелкин

https://t.me/AN_Metelkin

Аптекарский огород. 18.08.2022

Проект «Аптекарский огород»

Российское гомеопатическое общество (РГО), г. Москва

РГО – является общественным объединением, в состав которого входят производители, изготовители (аптеки) гомеопатических лекарственных средств, врачи.
www.rusmedhom.ru

НП « Научный Центр Технологий Устойчивого Развития «Любинка», Московская область.

НП « Научный Центр Технологий Устойчивого Развития «Любинка», научный центр, накопивший опыт выращивания лекарственных растений, имеет контакты с ботаническиии садами Москвы и Санкт-Петербурга. www.lubinka.ru

Проект “Аптекарский огород” стартовал в этом году и будет развиваться и дальше.
Это кооперация очень увлеченных людей, разных специальностей, врачей гомеопатов, биологов, ботаников, травников.
Цель кооперации, выстроить цепочку между держателями “Аптекарских огородов” и врачами, гомеопатами. Между Производителями и Заказчиками.

Наши консультанты по диким лекарственным  травам, это ботанические сады Москвы и Питера. По органическим грядкам у самый лучший консультант в России , Николай Курдюмов  ( https://kurdyumov.ru/ ). Многие годы он консультирует “соточников”: огородников и садоводов, живущих на сотках своих участков. Его книги расходятся огромными тиражами.
Поскольку этот проект направлен на здоровье людей, на их лечение и выздоровление, требования к участникам очень высокие: нельзя спутать вид растения, нельзя выращивать на отравленной химией почве. Нужно использовать принципы органического земледелия.
В этом году протестировали работу с двумя известными гомеопатическими фирмами: ООО ” Доктор Н” ( https://doctor-n.ru/   )  и ООО “ОЛЛО”  ( http://ollo.norna.ru/ ) . Эти две старейшие в России организации, производители лекарственных препаратов для гомеопатии,   приобрели растения в нашем питомнике, который создан на основе коллекции редких видов растений ботанического сада биофака МГУ им. М.В.Ломоносова, г. Москва.  На этом примере мы отработали комплект документов для оплаты растений на основе договора с физлицом. Пакет документов имеется. Оформили паспорта растений. Провели работы в сертифицированной лаборатории по оценке качества растений, получили положительное заключение.

Питомник существует более десяти лет, растения чувствуют себя прекрасно. И, самое важное, предложение о работе с врачами сделал мне Александр Раппопорт, зам директора ботсада МГУ с которым мы хорошо знакомы. Такми образом мы имеем научную поддержку, будем расширять свой питомник, для обеспечения наших Заказчиков качественным сырьем.

Сейчас мы готовимся  к заказам на следующий год. Мы получим список растений, зимой будем закупать семена растений и начнем выращивать саженцы и рассаду.
Хочу отдельно остановиться на названии проекта “Аптекарский огород”. Так называется раздел в коллекции растений в ботаническим саду , в Москве, на Проспекте Мира .

Аптекарские огороды имеют очень древнюю историю, в России их развитие  связывают с петровскими временами.
Поскольку лекарственные дикоросы, которые собирают в лесу могут быть краснокнижными растениями, мы намеренно обращаем внимание на выращивание  дикоросов на органических грядках, и тут решаем две задачи: облегчаем сбор дикоросов, гарантируем их качество, снимаем проблему уничтожения исчезающих видов, краснокнижных растений.
Поскольку список растений состоит из нескольких сот наименований мы и создаем кооперецию между аптекарскими огородами в разных областях страны, там где лучше всего произрастают нужные лечебные травы.
Мои личные контакты с двумя руководителями гомеопатических фирм показали, что мы имеем дело с увлеченными людьми, любяшими своё дело, серьезными профессоналами, готовыми помогать, передавать свои знания, не только их, но и растения из своих личных коллекции. Я считаю за честь иметь знакомство со специалистами такого высокого уровня.
Статья описанием условий работы, перечень растений для выращивания тут: https://lubinka.ru/lek_rast-22-06-2022/

Что мы собираемся делать?

Мы будем обучать новых участников проекта навыкам выращивания лекарственных растений. Что нужно делать уже сейчас:
– осенняя подготовка новых органических грядок, оборудование их системами капельного полива, органическая подкормка сидератами.
– расширение видового состава растений исходя из потребностей Заказчиков из РГО.
-анализ перечня растений: однолетники, многолетники, травы, кустарники, деревья, на предмет их высадки и ухода.
– выбор растений первого года для их высадки  в открытый грунт в следующем году
– закупка семян для получения расады в зимний период в фитошкафу с использованием фитоламп и вермигрунта собственного производства

Мы хотим создать региональное отделение проекта “Аптекарский огород” в Краснодарском крае, для выращивания местных лекарственых растений, совместно с регинальным отделением РГО Краснодарского края. Ольга Александровна Корвякова  Краснодарский край руководитель регионального отделения Российского Гомеопатического Общества дала све предварительное согласие на участие. С её помощью мы планируем привлечь ученых ботаников из Краснодара для консультаций проекта.

Мы предлагаем струетуру региональнооо отделения.

Первое региональное отделение формируется в Подмосковье. Следующее мы надеемся открыть в Краснодарском крае.
Надеемся в ближайшее время выпустить краткую методичку для руководителей региональных отделений.
Мы видим сейчас организацию работ таким образом:
1. Формируется на месте состав регинального отделения из трех человек.
А) Региональный представитель по проекту «Аптекарский огород», он представитель Исполнителей региона, области.
Б) Региональный предстааитель от РГО, он же представитель Заказчика.
В) Работник ботанического сада областного, ботаник, он будет отвечать за паспорт растения. Что обеспечивает достоверность материала.

Уже есть заявки по организации отделений проекта по областям:

Тверская область.

ELENA

Скажите, в Тверской области уже есть региональный представитель?

Оренбургская область.

Марина Поленова:
Оренбургская область с Бурдыгино Фонд развития сельских территорий “Земляки”. Очень заинтересовались проектом, готовы его реализовывать.

Белгородская область.
Людмила Кондратенко:
Белгородская область. Занимаемся агрогомеопатией уже 9 лет. Свою технологию розработали совместно с кафедрой Космодемьянского Л.В. Очень интересный проект. Мы готовы присоединиться.

Ульяновская область

Марина:
Всем доброго здравия. Я из Ульяновской области, селение родовых поместий Ладное. Заинтересована в развитии проекта. Готова выращивать и быть представителем.

Ярославская область.

Семяшкин Константин Михайдович:
Добрый день. Меня зовут Семяшкин Константин, выращиваю 3 сезон овощи, зелень без применения химии в экологически чистом районе Ярославской области, ПРП “Доброе”. Готов к сотрудничеству

Есть предложения по Ленинградской области.

Наши инфоресурсы на Телеграмм:

Аптекарский огород. Форум. https://t.me/aptekarskyi_ogorod

Участники проекта:

Российское Гомеопатическое Общество:

Президент РГО. Леонид Владимирович Космодемьянский,  док.мед.наук, научный руководитель Московского гомеопатического центра, профессор каф.гомеопатии ИВМ РУДН, национальный вице-президент Международной медицинской гомеопатической лиги (LMHI). Москва.

Наталья Петровна Нечаева, председатель совета производителей РГО, руководитель  ООО “Доктор Н”. Москва.
Александр Зиновьевич Островский, член правления РГО, руководитель  ООО “ОЛЛО”

НП “Научный Центр Технологий Устойчивого Развития Любинка”. Московская область.

Александр Николаевич Метелкин, к.б.н., председатнль правления.

 

Аптекарские огороды и лекарственное сырьё. 22 06 2022

Проект Аптекарские огороды

 

Российское гомеопатическое общество (РГО), г. Москва

РГО – является общественным объединением, в состав которого входят производители, изготовители (аптеки) гомеопатических лекарственных средств, врачи.
www.rusmedhom.ru 

Статья тематике https://lubinka.ru/aptekarsky_-ogorog-18-08-2023/ 

Заготовка и сбыт сырья из лекарственных растений.

В России развивается движение по созданию сельских ботанических садов.

Для сбора данных обмена информацией создана группа в ВК https://vk.com/selskiybotsad . Все желающие могут размещать там информацию и получить консультацию опытных специалистов.

Коммерческое предложение для руководителей сельских ботанических садов и питомников.

           Компания «Доктор Н» входит в состав Российского гомеопатического общества и  занимается продажей гомеопатических препаратов из лекарственных растений, выращенных в экологически чистых местах с использованием приемов органического земледелия.

Web: https://www.doctor-n.ru/

Нам поступило коммерческое предложение от руководителя отдела сбыта Светланы Титовой.

Данная организация заинтересована в приобретении сырья из лекарственных растений, выращенных на органических грядках или, при сборе дикоросов.

ЗАКАЗ НА  2022 год. Общее количество растений – 285 видов, общая цена 250090 руб.

Ниже скрин таблицы с пояснениями.

Таблица выложена тут: https://disk.yandex.ru/i/_2cbnlfMf6ZWaw

Я задал вопросы и получил ответы:

Как будет организована работа? Когда откликнется конкретный производитель сырья, мы будем связывать напрямую Производителя и Заказчика сырья для заключения договоров.

Юридическое оформление работ? Заключение договора между Заказчиком и Исполнителем: с физлицом, или с организацией. 

Оплата, когда и как производится? Оплата будет производиться Заказчиком (юр. лицом, компанией) на условиях заключенного договора. Как правило, мы заключаем договор и производим оплату после отгрузки или получения сырья. Гарантией оплаты является заключение договора.

Форма пересылки растений: некоторые фирмы готовы выехать нам место и из свежего сырья изготовить настойки. С пересылкой свежего сырья видим определенные трудности, поэтому этот вопрос будет решаться индивидуально при заключении договора с компанией, которая будет закупать сырье.

Адреса будут указаны в договорах, фирмы Заказчики из городов Москва и Краснодар.

Как будет организован контроль качества продукции? 

1) Нам нужен ботанический паспорт растения.

2) Письмо от организации Производителя сырья или физлица, подтверждающее, что растение не обрабатывались пестицидами и др. при выращивании, выращенных при использовании органических удобрений, в экологически-чистых районах,

3) Контроль качества сырья в лаборатории Роспотребнадзора, должен отдельно оплачиваться компанией (Заказчиком, который закупает сырье). Нам необходима информация, есть ли такие лаборатории, которые проводят оценку растительного сырья в месте расположении компаний производителей сырья.

4) С кем связаться если есть вопросы? Контактное лицо

Нечаева Наталия Петровна +7 (985) 765-21-56; +7 (985) 773-72-99

 

Что мы собираемся делать?

Мы будем обучать новых участников проекта навыкам выращивания лекарственных растений. Что нужно делать уже сейчас:
– осенняя подготовка новых органических грядок, оборудование их системами капельного полива, органическая подкормка сидератами.
– расширение видового состава растений исходя из потребностей Заказчиков из РГО.
-анализ перечня растений: однолетники, многолетники, травы, кустарники, деревья, на предмет их высадки и ухода.
– выбор растений первого года для их высадки  в открытый грунт в следующем году
– закупка семян для получения расады в зимний период в фитошкафу с использованием фитоламп и вермигрунта собственного производства

Материал подготовил А.Метелкин

Контакты

  https://vk.com/lubinka21vek  

https://t.me/AN_Metelkin 

#РусскаяЦивилизация. Проектирование. 3.06.2022

#РусскаяЦивилизация

Проектирование.

Александр Метелкин Z. www.lubinka.ru 

Курсовая работа студентов МАРХИ, руководитель проф. Михаэль Айхнер. Проект биосферного поселения на примере конкретной площадки в Вологодской области.

Давно давно задумал проект “Русская Цивилизация”. Он может объединить людей с различными верованиями идеями и устремлениями есть только одно условие, патриотизм, любовь к Родине. Уверен, в основе Русской Цивилизации лежит понимание, что нужно помогать друг другу.

Теоретическое вступление.

Мнение биологов: все живые существа, и человек, в том числе, могут вступать в следующие виды взаимодействия:

Хищничество: пара, хищник жертва.

Паразитирование: хозяин паразит.

Сожительство: проживание на одной территории, без любых взимодействий.

Симбиоз: сложение полезных качеств различных видов для взаимной пользы, взаимопомощи.

Человечество, сейчас от хищничества, паразитирования и сожительства переходит на стадию симбиоза: одноклеточные особи, частично посупаясь личной свободой, объединяются в новые симбиотические образования: общины. Моделью симбиоза может быть трех четырех поколенная семья, где каждому отведена своя благодатная роль и цель: счастье и покой сердца реализованы.

Некоторые мысли по этому поводу:

Мысль 1. Нам нужно понять, будем мы действовать или будем цепляться за слова и спроить. По делам и воздастся… По делам. Не по трёпу и пустословию..

Мысль 2. Мы живем в мире тварно-денежных отношений. Этот мир скоро исчезнет. Об этом в Апокалипсисе. Об этом многие интуитивно догадываются.

Мысль 3. Тварность, это стремление к благополучию тела, жизнь его хотелками. Рост благополучия, это путь в тупик.

Мысль 4. Тварь забывшая своего Творца исчезнет мягко и безболезненно. Депопуляция, это жизнь сладкая без детей, или с одним ребёнком. Аборты, убийства зародыша в себе, это следствие победившей тварности, смерть, гибель души.

Мысль 5. Наша вечная душа сотворенная Творцом, временно вселяется в тело животного вида homo sapiens, с целью ДУХОВНОГО РОСТА. В этом смысл нашего посещения этой планеты. После смерти изношеного физического тела, вечная душа покидает эту планету и возвращается домой. Это строго научные данные, воспроизводимые и подтвержденные в России. Следавательно нет разрыва между последними данными науки и Новым Заветом.

Мысль 6. Мы живем во времена Апокалипсиса, об этом текст Иоанна Кремтьянкина:” Собственноручная запись отца Иоанна: «Стой и смотри, что Я допустил для вашего вразумления без внезапной кончины людей. Виновных не ищите, виновных не ищите! Молитесь! Будьте в жизни всегда и во всем осторожны» .

Мысль 7. Тварный мир европейской цивилизации сам подписал себе смертный приговор, уничтожив институт семьи, единственный известный инструмент воспроизводства численности населения.

Мысль 8. Вполне возможно, что возникает новая форма человеческого общежития, нетварная, этой формой может быть Русская Культура, Русский Мир, Русская Цивилизация. Мы сейчас находимся на старте, в самом начале пути и у каждого из нас есть выбор, спорить и гуглить, цепляться за слова, либо действовать, действовать в парадигме новых ценностей, мира, дружбы, взаимопомощи, создавать новую, биосферную цивилизацию.

Мысль 9. Предупреждение, если мы не будем действовать #завтранаснебудет . Об этом есть публикации.

Мысль 10. Предлагаю создать банк идей, при одном условии: предложил свою идею, ты ее и воплощаешь, нужна помощь, предлагай варианты. Если твоя идея находит поддержку, значит она живая, жизненная, необходима людям.

Нам нужны люди с идеями, готовыми их воплощать. Люди – движки, люди – точки роста, люди – центры кристаллизации новых путей. Если твоя идея жизненная, она пробъется оживёт.

www.lubinka.ru эту площадку можно использовать.

Биосферная цивилизация.

Следующая цивилизация, будет биосферной, природосообразной, разгрузка мегаполисов приведет к созданию малых компактных поселений с автономной экономикой.

К тому же, небольшая сеть таких поселений может обслуживать большой производственный комплекс типа крупного завода или фабрики. Поселения могут быть расположены в достаточном удалении (5км) от промзоны..

Определение. Биосферные поселения, встраиваемые в живую природу, будут обладать следующими двумя необходимыми и достаточными, равными и взаимосвязанными свойствами по отношению к человеческим сообществам и к живой природе:

1. Для человека. Развернутая и самосовершенствующаяся система гармоничного развития человека, (духовного, физического и умственного) во всех периодах его проживания в поселении, от зачатия, до глубокой старости и захоронения его физического тела. Организация системы воспроизводства, как минимум постоянной численности поселения: две семьи – пять детей. Организация системы репликации (само воспроизводства) поселения на новых территориях. Создание сети поселений с устойчивым развитием.

2. Для биосферы. Создание естественной, природосообразной непрерывной системы мер по восстановлению разрушенных систем жизнеобеспечения: воды, воздуха, почвы и дикой природы с ее ландшафтами, флорой и фауной. Расширение влияния поселения на природу с целью ее охраны от истребления и восстановления на основе системы особо охраняемых природных территорий, создание запаса генофонда редких и исчезающих видов животных и растений в виде питомников, дендропарков и ботанических садов. Реконструкция первозданного почвенного, воздушного, водного и лесного баланса дикой природы.

Ожидаемый результат: создание сети автономных поселений с устойчивым развитием, а именно, биосферных поселений встроенных в природные биотопы с функциями охраны и восстановления нарушенных первооснов жизни: воды, воздуха, плодородного слоя почвы и природных ландшафтов.

Биосферное поселение – дендропарк, ботанический сад.

(Технические требования к проектированию.)

Цель органичное встраивание малых человеческих сообществ в дикую природу с ее сохранением и развитием.

1. Зонирование территории.

Принципы зонирования: плавный переход от зоны максимальной психической активности на производстве, чезез зону сна отдыха, в дикую природу..

Первая, центральная зона, включает в себя два района, спальный и общественно-производственный:

Спальный район, он же ботанический сад, дендропарк, съедобный лес.

Спальный район удален и выносится за территорию общественных зданий, производственных мастерских, на территоии спального района запрещен любой вид транспорта кроме велосипеда и электрокара, разрешен выгул ланей и пятнистых оленей, спальный район проектируется, как особо охраняемая природная территория, без громких звуков и розжига костров. Спальный район проектируется, как единый парковый ансамбль усадебного типа. Вход в спальный район случайным посетителям закрыт.

Район общественно-производственный.

Производственные здания, офисы, магазины и рынок, учебные мастерские. Здесь разрешается устраивать массовые мероприятия, прием посетителей. Кафе, рестораны, молодежные тусовки городского типа.

Общая стоянка автотранспорта, станция техобслуживания, коммунальные службы, автобусная остановка, прочее. Движение в районе пешее, велосипед, электрокар..

Вторая зона: зеленый пояс.

Лесопарковая зона опоясывающая первую зону. В лесопарковой зоне воспитательно-образовательный центр: ясли-детсад-школа-ВУЗ он лайн.

Оздоровительный спортивный центр: бассейн, баня, спортзал, озеро. Футбол волейбол, теннисный корт.

Лесной роддом. Отдельный автономный комплекс.

 

Зеленый пояс, это экспериментальная и производственная площадка для фермеского замледелия, выпаса скота, пасеки. Зона тишины, отдыха, рекреационная зона, детская спортивная площадка, скалодром. Выращивание редких и исчезающих видов растений.

Третий пояс: зона особо охраняемой природной территории (ООПТ местного значения, реинтродукция краснокнижников, ) запрет на массовое посещение, экологические тропы, организованные стоянки, туристические маршруты. Сбор лесных ягод, грибов…

Я приглашаю к сотворчеству.

Александр Метелкин, биолог, биофизик.

 

О семейных поместья и семейных поселениях в России

Вносится депутатами

Государственной Думы

Я.Е.Ниловым,

Д.А.Свищёвым,

С.Д.Леоновым,

А.Н.Диденко.

Б.Р.Пайкиным,

сенаторами Российской Федерации И.Н.Абрамовым

Е.В.Афанасьевой

Проект_______________

ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЗАКОН

О семейных поместьях и семейных поселениях

в Российской Федерации

https://sozd.duma.gov.ru/bill/87131-8

 

Статья 1. Предмет регулирования настоящего Федерального

закона

Настоящий Федеральный закон регулирует отношения, связанные с предоставлением гражданам Российской Федерации земельных участков, находящихся в государственной или муниципальной собственности и свободных от прав третьих лиц, и созданием на данных земельных участках семейных поместий и семейных поселений.

Статья 2. Основные понятия, используемые в настоящем

Федеральном законе

Для целей настоящего Федерального закона используются следующие основные понятия:

1) семейное поместье – земельный участок с находящимся на нём индивидуальным жилым домом и иными строениями вспомогательного использования, иным имуществом, на котором из поколения в поколение постоянно проживают члены семьи (граждане Российской Федерации, связанные между собой родством и (или) свойством), ведущие хозяйство, при котором внедряются экологические системы земледелия, сельскохозяйственное производство осуществляется с минимальным негативным влиянием на окружающую среду, обеспечивается проживание в благоприятной окружающей среде, осуществляются мероприятия по охране природы, возрождаются исконные народные обряды, праздники и ремесла, популяризируется здоровый образ жизни;

2) семейное поселение создаваемое гражданами населенное образование, состоящее из семейных поместий и земель общего пользования, предназначенных для размещения объектов инфраструктуры и иного имущества общего пользования;

3) уполномоченный орган – орган государственной власти или орган местного самоуправления, уполномоченные на предоставление в безвозмездное пользование, аренду или собственность земельных участков в соответствии с земельным законодательством, орган государственной власти, уполномоченный на предоставление лесных участков из состава земель лесного фонда в соответствии с лесным законодательством.

Статья 3. Законодательство Российской Федерации о семейных

поместьях и семейных поселениях

Законодательство Российской Федерации о семейных поместьях и семейных поселениях состоит из настоящего Федерального закона, других федеральных законов и принятых в соответствии с ними нормативных правовых актов.

Статья 4. Особенности предоставления гражданам

Российской Федерации земельных участков,

находящихся в государственной или муниципальной

собственности, для создания семейного поместья

1. Гражданину Российской Федерации на основании его заявления о предоставлении земельного участка для создания семейного поместья однократно может быть предоставлен в безвозмездное пользование земельный участок, свободный от прав третьих лиц и находящийся в государственной или муниципальной собственности, площадь которого не превышает одного гектара.

2. Перечень субъектов Российской Федерации, на территории которых земельные участки, находящиеся в государственной или муниципальной собственности, предоставляются гражданам Российской Федерации в безвозмездное пользование для создания семейного поместья, определяется Правительством Российской Федерации.

3. Площадь земельного участка, предоставляемого в безвозмездное пользование на основании заявления о создании семейного поместья, поданного несколькими членами семьи, исчисляется исходя из расчета не более одного гектара на каждого члена семьи.

4. Законами субъектов Российской Федерации могут быть определены территории, в границах которых земельные участки не могут быть предоставлены в безвозмездное пользование для создания семейного поместья в соответствии с настоящим Федеральным законом.

5. Земельный участок предоставляется в безвозмездное пользование гражданину в соответствии с настоящим Федеральным законом сроком на пять лет на основании договора безвозмездного пользования земельным участком.

6. Гражданин, с которым в соответствии с настоящим Федеральным законом заключен договор безвозмездного пользования земельным участком, предоставленным для создания семейного поместья, вправе до дня окончания срока действия указанного договора подать заявление о предоставлении такого земельного участка в собственность или в аренду на срок до сорока девяти лет, а в отношении предоставленного в безвозмездное пользование земельного участка из состава земель лесного фонда заявление о предоставлении такого земельного участка в аренду на срок до сорока девяти лет.

7. По истечении пяти лет со дня предоставления земельного участка в безвозмездное пользование земельный участок (за исключением земельных участков из состава земель лесного фонда) предоставляется гражданину в собственность бесплатно при условии, что в указанный период земельный участок использовался гражданином в соответствии с условиями договора безвозмездного пользования земельным участком.

8. По истечении пяти лет со дня предоставления земельного участка из состава земель лесного фонда в безвозмездное пользование гражданину такой земельный участок предоставляется ему в аренду при условии, что в указанный период земельный участок использовался гражданином в соответствии с условиями договора безвозмездного пользования земельным участком. По истечении десяти лет со дня заключения договора аренды земельного участка из состава земель лесного фонда такой земельный участок может быть предоставлен гражданину в собственность бесплатно при условии, что в указанный период земельный участок использовался гражданином в соответствии с условиями договора аренды земельного участка.

9. Заявление о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование подается или направляется в уполномоченный орган гражданином лично или посредством почтовой связи на бумажном носителе либо в форме электронного документа с использованием информационно-телекоммуникационной сети «Интернет».

9. Порядок предоставления земельного участка в безвозмездное пользование для создания семейного поместья и земельных участков объединениям граждан для создания семейных поселений, состоящих из семейных поместий, определяется Правительством Российской Федерации.

Статья 5. Информирование граждан о предоставлении

земельных участков для создания семейного

поместья

1.  На официальном сайте федерального органа исполнительной власти, уполномоченного в области государственной регистрации прав на недвижимое имущество и сделок с ним, кадастрового учета и ведения государственного кадастра недвижимости, в информационно-телекоммуникационной сети «Интернет» размещается следующая информация:

1)  о порядке и об условиях предоставления гражданам земельных участков в безвозмездное пользование, аренду, собственность для создания семейного поместья в соответствии с настоящим Федеральным законом;

2) о местоположении границ территорий, земель, зон, в границах которых земельные участки не могут быть предоставлены гражданам в безвозмездное пользование для создания семейного поместья в соответствии с настоящим Федеральным законом;

3) о местоположении границ земельных участков, которые не могут быть предоставлены гражданам в безвозмездное пользование в соответствии с настоящим Федеральным законом;

4) о поступлении заявления гражданина о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование для создания семейного поместья и о местоположении границ данного земельного участка;

5) о выбранных гражданином виде или видах разрешенного использования земельного участка, предоставленного гражданину в безвозмездное пользование для создания семейного поместья.

2. Информация, указанная в части 1 настоящей статьи, должна обеспечивать без взимания платы возможность:

1) подготовки и направления гражданином в уполномоченный орган в форме электронного документа заявления о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование, аренду или собственность для создания семейного поместья и иных предусмотренных установленным порядком предоставления земельных участков документов и сведений.

2) информирования уполномоченным органом гражданина о решениях, принятых в связи с его заявлением о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование, аренду или собственность для создания семейного поместья;

3) направления уполномоченным органом гражданину проекта договора безвозмездного пользования земельным участком, аренды или купли-продажи земельного участка, решения о предоставлении земельного участка в собственность бесплатно, иных документов и сведений, направление которых уполномоченным органом гражданину предусмотрено настоящим Федеральным законом.

Статья 6. Использование земельного участка, предоставленного

для создания семейного поместья

1.  Земельный участок, предоставленный для создания семейного поместья, может использоваться для осуществления любого вида или любых видов разрешенного использования без каких-либо согласований и разрешений.

2.  При возведении на земельном участке индивидуального жилого дома для круглогодичного (постоянного) проживания членов семьи, а также при строительстве капитальных строений и сооружений вспомогательного использования в границах земельного участка, предназначенного для обустройства семейного поместья, получение разрешений на строительство не требуется.

3. На земельном участке под застройку отводится не более 10 процентов площади земельного участка.

4. Земельные участки, предоставленные гражданам для создания семейного поместья, не подлежат разделу на части, если площадь, хотя бы одного из вновь образованных земельных участков будет менее одного гектара.

5. Передача прав на земельный участок, предоставленный для создания семейного поместья, иным лицам или организациям не допускается.

Статья 7. Основания для отказа в предоставлении гражданину

земельного участка, переданного в безвозмездное

пользование для обустройства семейного поместья,

в собственность или в аренду

1. Уполномоченный орган принимает решение об отказе в предоставлении гражданину земельного участка переданного в безвозмездное пользование для обустройства семейного поместья, в собственность или аренду в следующих случаях:

1) на земельном участке отсутствует индивидуальный жилой дом или незавершенный объект индивидуального жилищного строительства;

2) на земельном участке не осуществляются разрешенные виды хозяйственной деятельности либо осуществляется хозяйственная деятельность с нарушением настоящего Федерального закона;

3) гражданином и членами его семьи направлено в уполномоченный орган заявление об отказе осуществлять обустройство семейного поместья.

2. При изъятии земельного участка в случае неиспользования его для обустройства семейного поместья, осуществляется компенсация в размере подтвержденных затрат на произведенные неотделимые улучшения земельного участка. При этом земельный участок, предоставленный в соответствии с настоящим Федеральным законом, не подлежит компенсации.

3. Порядок изъятия земельного участка, предоставленного в соответствии с настоящим Федеральным законом и не используемого для обустройства семейного поместья, устанавливается Правительством Российской Федерации.

Статья 8. Организация семейных поселений

1. В Российской Федерации гарантируется право граждан Российской Федерации на создание семейных поселений, состоящих из семейных поместий, включая:

– право граждан, обустраивающих семейные поместья на совместно расположенных земельных участках, на объединение в семейное поселение;

– право граждан (инициативных групп) на безвозмездное получение земельного участка для создания семейных поселений;

– право жителей семейного поселения на формирование общих территорий семейных поместий и размещение необходимого семейному поселению имущества общего пользования.

2. Правовое положение семейного поселения, образуемого по инициативе граждан Российской Федерации, обустраивающих семейные поместья на совместно расположенных земельных участках, определяется настоящим Федеральным законом и законами субъектов Российской Федерации о семейных поселениях.

3. Граждане, обустраивающие семейные поместья на совместно расположенных земельных участках, принявшие решение об объединении в семейное поселение, утвердившие его название и разработавшие проект планировки его территории, имеют право на безвозмездное получение земельных участков единым массивом общей площадью соответственно количеству заявлений граждан, желающих совместно обустраивать семейные поместья, включая площадь, необходимых для формирования общих территорий семейного поселения и размещения необходимого семейному поселению имущества общего пользования.

4. Органы государственной власти, органы местного самоуправления оказывают содействие обустройству территории семейных поселений посредством строительства объектов коммунальной, транспортной, социальной инфраструктур.

Статья 9. Применение положений законодательства Российской

Федерации в отношении семейных поместий и

семейных поселений

1. Правовой режим земельных участков семейных поместий определяется Федеральным законом «О семейных поместьях и семейных поселениях в Российской Федерации» и принятыми в соответствии с ним законами субъектов Российской Федерации.

2. К гражданам, обустраивающим семейных поместья, применяются льготы, предусмотренные для производителей сельскохозяйственной продукции Федеральным законом от 29 декабря 2006 года № 264-ФЗ «О развитии сельского хозяйства» и Федеральным законом от 7 июля 2003 года № 112-ФЗ «О личном подсобном хозяйстве».

3. При возведении на земельном участке семейного поместья объекта индивидуального жилищного строительства могут быть использованы средства материнского (семейного) капитала в соответствии с Федеральным законом от 29 декабря 2006 года № 256-ФЗ «О дополнительных мерах государственной поддержки семей, имеющих детей».

5. Меры государственной поддержки граждан, обустраивающих семейные поместья, определяются законами субъектов Российской Федерации и нормативными правовыми актами органов местного самоуправления.

Статья 10. Вступление в силу настоящего Федерального закона

Настоящий Федеральный закон вступает в силу с 1 января 2023 года.

Президент

Российской Федерации

Вносится депутатами

Государственной Думы

Я.Е.Ниловым,

Д.А.Свищёвым,

С.Д.Леоновым,

А.Н.Диденко.

Б.Р.Пайкиным,

сенаторами Российской Федерации И.Н.Абрамовым

Е.В.Афанасьевой

Проект_______________

ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЗАКОН

О семейных поместьях и семейных поселениях

в Российской Федерации

Статья 1. Предмет регулирования настоящего Федерального

закона

Настоящий Федеральный закон регулирует отношения, связанные с предоставлением гражданам Российской Федерации земельных участков, находящихся в государственной или муниципальной собственности и свободных от прав третьих лиц, и созданием на данных земельных участках семейных поместий и семейных поселений.

Статья 2. Основные понятия, используемые в настоящем

Федеральном законе

Для целей настоящего Федерального закона используются следующие основные понятия:

1) семейное поместье – земельный участок с находящимся на нём индивидуальным жилым домом и иными строениями вспомогательного использования, иным имуществом, на котором из поколения в поколение постоянно проживают члены семьи (граждане Российской Федерации, связанные между собой родством и (или) свойством), ведущие хозяйство, при котором внедряются экологические системы земледелия, сельскохозяйственное производство осуществляется с минимальным негативным влиянием на окружающую среду, обеспечивается проживание в благоприятной окружающей среде, осуществляются мероприятия по охране природы, возрождаются исконные народные обряды, праздники и ремесла, популяризируется здоровый образ жизни;

2) семейное поселение создаваемое гражданами населенное образование, состоящее из семейных поместий и земель общего пользования, предназначенных для размещения объектов инфраструктуры и иного имущества общего пользования;

3) уполномоченный орган – орган государственной власти или орган местного самоуправления, уполномоченные на предоставление в безвозмездное пользование, аренду или собственность земельных участков в соответствии с земельным законодательством, орган государственной власти, уполномоченный на предоставление лесных участков из состава земель лесного фонда в соответствии с лесным законодательством.

Статья 3. Законодательство Российской Федерации о семейных

поместьях и семейных поселениях

Законодательство Российской Федерации о семейных поместьях и семейных поселениях состоит из настоящего Федерального закона, других федеральных законов и принятых в соответствии с ними нормативных правовых актов.

Статья 4. Особенности предоставления гражданам

Российской Федерации земельных участков,

находящихся в государственной или муниципальной

собственности, для создания семейного поместья

1. Гражданину Российской Федерации на основании его заявления о предоставлении земельного участка для создания семейного поместья однократно может быть предоставлен в безвозмездное пользование земельный участок, свободный от прав третьих лиц и находящийся в государственной или муниципальной собственности, площадь которого не превышает одного гектара.

2. Перечень субъектов Российской Федерации, на территории которых земельные участки, находящиеся в государственной или муниципальной собственности, предоставляются гражданам Российской Федерации в безвозмездное пользование для создания семейного поместья, определяется Правительством Российской Федерации.

3. Площадь земельного участка, предоставляемого в безвозмездное пользование на основании заявления о создании семейного поместья, поданного несколькими членами семьи, исчисляется исходя из расчета не более одного гектара на каждого члена семьи.

4. Законами субъектов Российской Федерации могут быть определены территории, в границах которых земельные участки не могут быть предоставлены в безвозмездное пользование для создания семейного поместья в соответствии с настоящим Федеральным законом.

5. Земельный участок предоставляется в безвозмездное пользование гражданину в соответствии с настоящим Федеральным законом сроком на пять лет на основании договора безвозмездного пользования земельным участком.

6. Гражданин, с которым в соответствии с настоящим Федеральным законом заключен договор безвозмездного пользования земельным участком, предоставленным для создания семейного поместья, вправе до дня окончания срока действия указанного договора подать заявление о предоставлении такого земельного участка в собственность или в аренду на срок до сорока девяти лет, а в отношении предоставленного в безвозмездное пользование земельного участка из состава земель лесного фонда заявление о предоставлении такого земельного участка в аренду на срок до сорока девяти лет.

7. По истечении пяти лет со дня предоставления земельного участка в безвозмездное пользование земельный участок (за исключением земельных участков из состава земель лесного фонда) предоставляется гражданину в собственность бесплатно при условии, что в указанный период земельный участок использовался гражданином в соответствии с условиями договора безвозмездного пользования земельным участком.

8. По истечении пяти лет со дня предоставления земельного участка из состава земель лесного фонда в безвозмездное пользование гражданину такой земельный участок предоставляется ему в аренду при условии, что в указанный период земельный участок использовался гражданином в соответствии с условиями договора безвозмездного пользования земельным участком. По истечении десяти лет со дня заключения договора аренды земельного участка из состава земель лесного фонда такой земельный участок может быть предоставлен гражданину в собственность бесплатно при условии, что в указанный период земельный участок использовался гражданином в соответствии с условиями договора аренды земельного участка.

9. Заявление о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование подается или направляется в уполномоченный орган гражданином лично или посредством почтовой связи на бумажном носителе либо в форме электронного документа с использованием информационно-телекоммуникационной сети «Интернет».

9. Порядок предоставления земельного участка в безвозмездное пользование для создания семейного поместья и земельных участков объединениям граждан для создания семейных поселений, состоящих из семейных поместий, определяется Правительством Российской Федерации.

Статья 5. Информирование граждан о предоставлении

земельных участков для создания семейного

поместья

1.  На официальном сайте федерального органа исполнительной власти, уполномоченного в области государственной регистрации прав на недвижимое имущество и сделок с ним, кадастрового учета и ведения государственного кадастра недвижимости, в информационно-телекоммуникационной сети «Интернет» размещается следующая информация:

1)  о порядке и об условиях предоставления гражданам земельных участков в безвозмездное пользование, аренду, собственность для создания семейного поместья в соответствии с настоящим Федеральным законом;

2) о местоположении границ территорий, земель, зон, в границах которых земельные участки не могут быть предоставлены гражданам в безвозмездное пользование для создания семейного поместья в соответствии с настоящим Федеральным законом;

3) о местоположении границ земельных участков, которые не могут быть предоставлены гражданам в безвозмездное пользование в соответствии с настоящим Федеральным законом;

4) о поступлении заявления гражданина о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование для создания семейного поместья и о местоположении границ данного земельного участка;

5) о выбранных гражданином виде или видах разрешенного использования земельного участка, предоставленного гражданину в безвозмездное пользование для создания семейного поместья.

2. Информация, указанная в части 1 настоящей статьи, должна обеспечивать без взимания платы возможность:

1) подготовки и направления гражданином в уполномоченный орган в форме электронного документа заявления о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование, аренду или собственность для создания семейного поместья и иных предусмотренных установленным порядком предоставления земельных участков документов и сведений.

2) информирования уполномоченным органом гражданина о решениях, принятых в связи с его заявлением о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование, аренду или собственность для создания семейного поместья;

3) направления уполномоченным органом гражданину проекта договора безвозмездного пользования земельным участком, аренды или купли-продажи земельного участка, решения о предоставлении земельного участка в собственность бесплатно, иных документов и сведений, направление которых уполномоченным органом гражданину предусмотрено настоящим Федеральным законом.

Статья 6. Использование земельного участка, предоставленного

для создания семейного поместья

1.  Земельный участок, предоставленный для создания семейного поместья, может использоваться для осуществления любого вида или любых видов разрешенного использования без каких-либо согласований и разрешений.

2.  При возведении на земельном участке индивидуального жилого дома для круглогодичного (постоянного) проживания членов семьи, а также при строительстве капитальных строений и сооружений вспомогательного использования в границах земельного участка, предназначенного для обустройства семейного поместья, получение разрешений на строительство не требуется.

3. На земельном участке под застройку отводится не более 10 процентов площади земельного участка.

4. Земельные участки, предоставленные гражданам для создания семейного поместья, не подлежат разделу на части, если площадь, хотя бы одного из вновь образованных земельных участков будет менее одного гектара.

5. Передача прав на земельный участок, предоставленный для создания семейного поместья, иным лицам или организациям не допускается.

Статья 7. Основания для отказа в предоставлении гражданину

земельного участка, переданного в безвозмездное

пользование для обустройства семейного поместья,

в собственность или в аренду

1. Уполномоченный орган принимает решение об отказе в предоставлении гражданину земельного участка переданного в безвозмездное пользование для обустройства семейного поместья, в собственность или аренду в следующих случаях:

1) на земельном участке отсутствует индивидуальный жилой дом или незавершенный объект индивидуального жилищного строительства;

2) на земельном участке не осуществляются разрешенные виды хозяйственной деятельности либо осуществляется хозяйственная деятельность с нарушением настоящего Федерального закона;

3) гражданином и членами его семьи направлено в уполномоченный орган заявление об отказе осуществлять обустройство семейного поместья.

2. При изъятии земельного участка в случае неиспользования его для обустройства семейного поместья, осуществляется компенсация в размере подтвержденных затрат на произведенные неотделимые улучшения земельного участка. При этом земельный участок, предоставленный в соответствии с настоящим Федеральным законом, не подлежит компенсации.

3. Порядок изъятия земельного участка, предоставленного в соответствии с настоящим Федеральным законом и не используемого для обустройства семейного поместья, устанавливается Правительством Российской Федерации.

Статья 8. Организация семейных поселений

1. В Российской Федерации гарантируется право граждан Российской Федерации на создание семейных поселений, состоящих из семейных поместий, включая:

– право граждан, обустраивающих семейные поместья на совместно расположенных земельных участках, на объединение в семейное поселение;

– право граждан (инициативных групп) на безвозмездное получение земельного участка для создания семейных поселений;

– право жителей семейного поселения на формирование общих территорий семейных поместий и размещение необходимого семейному поселению имущества общего пользования.

2. Правовое положение семейного поселения, образуемого по инициативе граждан Российской Федерации, обустраивающих семейные поместья на совместно расположенных земельных участках, определяется настоящим Федеральным законом и законами субъектов Российской Федерации о семейных поселениях.

3. Граждане, обустраивающие семейные поместья на совместно расположенных земельных участках, принявшие решение об объединении в семейное поселение, утвердившие его название и разработавшие проект планировки его территории, имеют право на безвозмездное получение земельных участков единым массивом общей площадью соответственно количеству заявлений граждан, желающих совместно обустраивать семейные поместья, включая площадь, необходимых для формирования общих территорий семейного поселения и размещения необходимого семейному поселению имущества общего пользования.

4. Органы государственной власти, органы местного самоуправления оказывают содействие обустройству территории семейных поселений посредством строительства объектов коммунальной, транспортной, социальной инфраструктур.

Статья 9. Применение положений законодательства Российской

Федерации в отношении семейных поместий и

семейных поселений

1. Правовой режим земельных участков семейных поместий определяется Федеральным законом «О семейных поместьях и семейных поселениях в Российской Федерации» и принятыми в соответствии с ним законами субъектов Российской Федерации.

2. К гражданам, обустраивающим семейных поместья, применяются льготы, предусмотренные для производителей сельскохозяйственной продукции Федеральным законом от 29 декабря 2006 года № 264-ФЗ «О развитии сельского хозяйства» и Федеральным законом от 7 июля 2003 года № 112-ФЗ «О личном подсобном хозяйстве».

3. При возведении на земельном участке семейного поместья объекта индивидуального жилищного строительства могут быть использованы средства материнского (семейного) капитала в соответствии с Федеральным законом от 29 декабря 2006 года № 256-ФЗ «О дополнительных мерах государственной поддержки семей, имеющих детей».

5. Меры государственной поддержки граждан, обустраивающих семейные поместья, определяются законами субъектов Российской Федерации и нормативными правовыми актами органов местного самоуправления.

Статья 10. Вступление в силу настоящего Федерального закона

Настоящий Федеральный закон вступает в силу с 1 января 2023 года.

Президент

Российской Федерации

Вносится депутатами

Государственной Думы

Я.Е.Ниловым,

Д.А.Свищёвым,

С.Д.Леоновым,

А.Н.Диденко.

Б.Р.Пайкиным,

сенаторами Российской Федерации И.Н.Абрамовым

Е.В.Афанасьевой

Проект_______________

ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЗАКОН

О семейных поместьях и семейных поселениях

в Российской Федерации

Статья 1. Предмет регулирования настоящего Федерального

закона

Настоящий Федеральный закон регулирует отношения, связанные с предоставлением гражданам Российской Федерации земельных участков, находящихся в государственной или муниципальной собственности и свободных от прав третьих лиц, и созданием на данных земельных участках семейных поместий и семейных поселений.

Статья 2. Основные понятия, используемые в настоящем

Федеральном законе

Для целей настоящего Федерального закона используются следующие основные понятия:

1) семейное поместье – земельный участок с находящимся на нём индивидуальным жилым домом и иными строениями вспомогательного использования, иным имуществом, на котором из поколения в поколение постоянно проживают члены семьи (граждане Российской Федерации, связанные между собой родством и (или) свойством), ведущие хозяйство, при котором внедряются экологические системы земледелия, сельскохозяйственное производство осуществляется с минимальным негативным влиянием на окружающую среду, обеспечивается проживание в благоприятной окружающей среде, осуществляются мероприятия по охране природы, возрождаются исконные народные обряды, праздники и ремесла, популяризируется здоровый образ жизни;

2) семейное поселение создаваемое гражданами населенное образование, состоящее из семейных поместий и земель общего пользования, предназначенных для размещения объектов инфраструктуры и иного имущества общего пользования;

3) уполномоченный орган – орган государственной власти или орган местного самоуправления, уполномоченные на предоставление в безвозмездное пользование, аренду или собственность земельных участков в соответствии с земельным законодательством, орган государственной власти, уполномоченный на предоставление лесных участков из состава земель лесного фонда в соответствии с лесным законодательством.

Статья 3. Законодательство Российской Федерации о семейных

поместьях и семейных поселениях

Законодательство Российской Федерации о семейных поместьях и семейных поселениях состоит из настоящего Федерального закона, других федеральных законов и принятых в соответствии с ними нормативных правовых актов.

Статья 4. Особенности предоставления гражданам

Российской Федерации земельных участков,

находящихся в государственной или муниципальной

собственности, для создания семейного поместья

1. Гражданину Российской Федерации на основании его заявления о предоставлении земельного участка для создания семейного поместья однократно может быть предоставлен в безвозмездное пользование земельный участок, свободный от прав третьих лиц и находящийся в государственной или муниципальной собственности, площадь которого не превышает одного гектара.

2. Перечень субъектов Российской Федерации, на территории которых земельные участки, находящиеся в государственной или муниципальной собственности, предоставляются гражданам Российской Федерации в безвозмездное пользование для создания семейного поместья, определяется Правительством Российской Федерации.

3. Площадь земельного участка, предоставляемого в безвозмездное пользование на основании заявления о создании семейного поместья, поданного несколькими членами семьи, исчисляется исходя из расчета не более одного гектара на каждого члена семьи.

4. Законами субъектов Российской Федерации могут быть определены территории, в границах которых земельные участки не могут быть предоставлены в безвозмездное пользование для создания семейного поместья в соответствии с настоящим Федеральным законом.

5. Земельный участок предоставляется в безвозмездное пользование гражданину в соответствии с настоящим Федеральным законом сроком на пять лет на основании договора безвозмездного пользования земельным участком.

6. Гражданин, с которым в соответствии с настоящим Федеральным законом заключен договор безвозмездного пользования земельным участком, предоставленным для создания семейного поместья, вправе до дня окончания срока действия указанного договора подать заявление о предоставлении такого земельного участка в собственность или в аренду на срок до сорока девяти лет, а в отношении предоставленного в безвозмездное пользование земельного участка из состава земель лесного фонда заявление о предоставлении такого земельного участка в аренду на срок до сорока девяти лет.

7. По истечении пяти лет со дня предоставления земельного участка в безвозмездное пользование земельный участок (за исключением земельных участков из состава земель лесного фонда) предоставляется гражданину в собственность бесплатно при условии, что в указанный период земельный участок использовался гражданином в соответствии с условиями договора безвозмездного пользования земельным участком.

8. По истечении пяти лет со дня предоставления земельного участка из состава земель лесного фонда в безвозмездное пользование гражданину такой земельный участок предоставляется ему в аренду при условии, что в указанный период земельный участок использовался гражданином в соответствии с условиями договора безвозмездного пользования земельным участком. По истечении десяти лет со дня заключения договора аренды земельного участка из состава земель лесного фонда такой земельный участок может быть предоставлен гражданину в собственность бесплатно при условии, что в указанный период земельный участок использовался гражданином в соответствии с условиями договора аренды земельного участка.

9. Заявление о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование подается или направляется в уполномоченный орган гражданином лично или посредством почтовой связи на бумажном носителе либо в форме электронного документа с использованием информационно-телекоммуникационной сети «Интернет».

9. Порядок предоставления земельного участка в безвозмездное пользование для создания семейного поместья и земельных участков объединениям граждан для создания семейных поселений, состоящих из семейных поместий, определяется Правительством Российской Федерации.

Статья 5. Информирование граждан о предоставлении

земельных участков для создания семейного

поместья

1.  На официальном сайте федерального органа исполнительной власти, уполномоченного в области государственной регистрации прав на недвижимое имущество и сделок с ним, кадастрового учета и ведения государственного кадастра недвижимости, в информационно-телекоммуникационной сети «Интернет» размещается следующая информация:

1)  о порядке и об условиях предоставления гражданам земельных участков в безвозмездное пользование, аренду, собственность для создания семейного поместья в соответствии с настоящим Федеральным законом;

2) о местоположении границ территорий, земель, зон, в границах которых земельные участки не могут быть предоставлены гражданам в безвозмездное пользование для создания семейного поместья в соответствии с настоящим Федеральным законом;

3) о местоположении границ земельных участков, которые не могут быть предоставлены гражданам в безвозмездное пользование в соответствии с настоящим Федеральным законом;

4) о поступлении заявления гражданина о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование для создания семейного поместья и о местоположении границ данного земельного участка;

5) о выбранных гражданином виде или видах разрешенного использования земельного участка, предоставленного гражданину в безвозмездное пользование для создания семейного поместья.

2. Информация, указанная в части 1 настоящей статьи, должна обеспечивать без взимания платы возможность:

1) подготовки и направления гражданином в уполномоченный орган в форме электронного документа заявления о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование, аренду или собственность для создания семейного поместья и иных предусмотренных установленным порядком предоставления земельных участков документов и сведений.

2) информирования уполномоченным органом гражданина о решениях, принятых в связи с его заявлением о предоставлении земельного участка в безвозмездное пользование, аренду или собственность для создания семейного поместья;

3) направления уполномоченным органом гражданину проекта договора безвозмездного пользования земельным участком, аренды или купли-продажи земельного участка, решения о предоставлении земельного участка в собственность бесплатно, иных документов и сведений, направление которых уполномоченным органом гражданину предусмотрено настоящим Федеральным законом.

Статья 6. Использование земельного участка, предоставленного

для создания семейного поместья

1.  Земельный участок, предоставленный для создания семейного поместья, может использоваться для осуществления любого вида или любых видов разрешенного использования без каких-либо согласований и разрешений.

2.  При возведении на земельном участке индивидуального жилого дома для круглогодичного (постоянного) проживания членов семьи, а также при строительстве капитальных строений и сооружений вспомогательного использования в границах земельного участка, предназначенного для обустройства семейного поместья, получение разрешений на строительство не требуется.

3. На земельном участке под застройку отводится не более 10 процентов площади земельного участка.

4. Земельные участки, предоставленные гражданам для создания семейного поместья, не подлежат разделу на части, если площадь, хотя бы одного из вновь образованных земельных участков будет менее одного гектара.

5. Передача прав на земельный участок, предоставленный для создания семейного поместья, иным лицам или организациям не допускается.

Статья 7. Основания для отказа в предоставлении гражданину

земельного участка, переданного в безвозмездное

пользование для обустройства семейного поместья,

в собственность или в аренду

1. Уполномоченный орган принимает решение об отказе в предоставлении гражданину земельного участка переданного в безвозмездное пользование для обустройства семейного поместья, в собственность или аренду в следующих случаях:

1) на земельном участке отсутствует индивидуальный жилой дом или незавершенный объект индивидуального жилищного строительства;

2) на земельном участке не осуществляются разрешенные виды хозяйственной деятельности либо осуществляется хозяйственная деятельность с нарушением настоящего Федерального закона;

3) гражданином и членами его семьи направлено в уполномоченный орган заявление об отказе осуществлять обустройство семейного поместья.

2. При изъятии земельного участка в случае неиспользования его для обустройства семейного поместья, осуществляется компенсация в размере подтвержденных затрат на произведенные неотделимые улучшения земельного участка. При этом земельный участок, предоставленный в соответствии с настоящим Федеральным законом, не подлежит компенсации.

3. Порядок изъятия земельного участка, предоставленного в соответствии с настоящим Федеральным законом и не используемого для обустройства семейного поместья, устанавливается Правительством Российской Федерации.

Статья 8. Организация семейных поселений

1. В Российской Федерации гарантируется право граждан Российской Федерации на создание семейных поселений, состоящих из семейных поместий, включая:

– право граждан, обустраивающих семейные поместья на совместно расположенных земельных участках, на объединение в семейное поселение;

– право граждан (инициативных групп) на безвозмездное получение земельного участка для создания семейных поселений;

– право жителей семейного поселения на формирование общих территорий семейных поместий и размещение необходимого семейному поселению имущества общего пользования.

2. Правовое положение семейного поселения, образуемого по инициативе граждан Российской Федерации, обустраивающих семейные поместья на совместно расположенных земельных участках, определяется настоящим Федеральным законом и законами субъектов Российской Федерации о семейных поселениях.

3. Граждане, обустраивающие семейные поместья на совместно расположенных земельных участках, принявшие решение об объединении в семейное поселение, утвердившие его название и разработавшие проект планировки его территории, имеют право на безвозмездное получение земельных участков единым массивом общей площадью соответственно количеству заявлений граждан, желающих совместно обустраивать семейные поместья, включая площадь, необходимых для формирования общих территорий семейного поселения и размещения необходимого семейному поселению имущества общего пользования.

4. Органы государственной власти, органы местного самоуправления оказывают содействие обустройству территории семейных поселений посредством строительства объектов коммунальной, транспортной, социальной инфраструктур.

Статья 9. Применение положений законодательства Российской

Федерации в отношении семейных поместий и

семейных поселений

1. Правовой режим земельных участков семейных поместий определяется Федеральным законом «О семейных поместьях и семейных поселениях в Российской Федерации» и принятыми в соответствии с ним законами субъектов Российской Федерации.

2. К гражданам, обустраивающим семейных поместья, применяются льготы, предусмотренные для производителей сельскохозяйственной продукции Федеральным законом от 29 декабря 2006 года № 264-ФЗ «О развитии сельского хозяйства» и Федеральным законом от 7 июля 2003 года № 112-ФЗ «О личном подсобном хозяйстве».

3. При возведении на земельном участке семейного поместья объекта индивидуального жилищного строительства могут быть использованы средства материнского (семейного) капитала в соответствии с Федеральным законом от 29 декабря 2006 года № 256-ФЗ «О дополнительных мерах государственной поддержки семей, имеющих детей».

5. Меры государственной поддержки граждан, обустраивающих семейные поместья, определяются законами субъектов Российской Федерации и нормативными правовыми актами органов местного самоуправления.

Статья 10. Вступление в силу настоящего Федерального закона

Настоящий Федеральный закон вступает в силу с 1 января 2023 года.

Президент

Российской Федерации

 

Автореферат А.Н.Метелкин “Голографическая интерферометрия и лазерная микроскопия эритроцитов ” 07.03.2021

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР

ЦЕНТРАЛЬНЫЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА

И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ

На правах рукописи

МЕТЕЛКИН

АЛЕКСАНДР НИКОЛАЕВИЧ

ГОЛОГРАФИЧЕСКАЯ ИНТЕРФЕРОМЕТРИЯ И

ЛАЗЕРНАЯ МИКРОСКОПИЯ ЭРИТРОЦИТОВ

14.00.29 – гематология и переливание крови

01.04.05 — оптика

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Москва, 1981 г.

Работа выполнена во 2ом Московском ордена Ленина Государственном институте имени Н.И.Пирогова Министерства здравоохранения РСФСР и во Всесоюзном научно-исследовательском институте оптико-физических измерений.

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор

Ю.А.Князев

доктор технических наук, ст.н.с.

В.М. Гинзбург

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, ст.н.с.

Ю.А Шарова

доктор физико-математических наук, доцент

Б.С.Ринкевичюс

Ведущая организация:

Всесоюзный онкологический научный. центр АМН СССР. Защита состоится “__ ” 198 г. В __ часов на заседании Специализированного Совета Д 074.08.01 в Центральном ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательском институте гематологии и переливания крови /Москва, 125167, Новозыковский проезд, 4а/.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан “__ ” 198_.

Ученый секретарь

Специализированного Совета

доктор медицинских наук, профессор Л.Н.Пушкарь

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Расширение и углубление представлений о жизнедеятельности эритроцитов периферической крови непосредственно связано с внедрением в практику новейших методов исследований. Этим определяется актуальность проблемы анализа нефиксированных эритроцитов человека с целью изучения и количественной оценки их размеров, формы, массы и концентрации гемоглобина в норме и патологии методами голографической интерферометрии и лазерной микроскопии.

В литературе имеется сравнительно мало работ, посвященных анализу свойств нефиксированных эритроцитов, что объясняется трудностями исследования живых клеток. Традиционные методы анализа размеров эритроцитов, как правило, позволяют получать усредненные данные, что делает невозможным оценку внутренней структуры популяции эритроцитов. Даже такие современные методы исследования как электронная микроскопия /трансмиссионная и растровая/, требуют фиксации клеток, что приводит к определенному изменению их истинных размеров и значительно затрудняет изучение эритроцитов в динамике.

Методы голографической интерферометрии и лазерной микроскопии лишены описанных недостатков и позволяют исследовать живые клетки, анализировать форму эритроцитов по их поперечному сечению /Evans, Fang, 1972 /, производить количественную оценку формы /Reevs e a, 1978/, измерять объем и площадь поверхности эритроцитов, определять концентрации внутриклеточных веществ /Evans, Leblond, 1973/. Новые цитоморфометрические методы: голографическая интерферометрия и лазерная микроскопия позволяют проводить оценку состояния эритроцитов в динамике по таким важнейшим параметрам как форма и размеры, масса и концентрация плотных веществ в клетке. В настоящее время в Советском Союзе и за рубежом не имеется специальной голографической аппаратуры для исследования биомедицинских микрообъектов. В связи с вышеизложенным представляются актуальные цели и задачи данной работы.

Цели работы.

Целями работы являлись:

1. Выбор и реализация наиболее оптимальной схемы лазерного, голографического интерференционного микроскопа для анализа биологически1 микрообъектов, разработка количественных методик оценки размеров, формы, массы и концентрации гемоглобина в эритроцитах.

2. Проведение сравнительной характеристики свойств популяций эритроцитов в норме и патологии. Сопоставление полученных новыми методами результатов с известными данными. Количественный и качественный анализ основных преобразований формы и размеров эритроцитов в норме, при наследственных изменениях мембраны эритроцитов и при нарушениях состава плазмы.

Основные задачи исследования

1. Выбор и реализация наиболее оптимальной схемы лазерного, голографического интерференционного микроскопа для получения высококачественных интерферограмм и микрофотографий живых клеток малых размеров /51О мкм/.

2. Разработка количественных методик анализа эритроцитов на основе данных голографической интерферометрии и лазерной микроскопии по следующим параметрам: диаметр, максимальная и минимальная толщина, площадь поверхности, объем, коэффициент сферичности эритроцитов, масса и концентрация гемоглобина в клетках. Выработка количественных критериев оценки формы эритроцитов по их поперечному сечению.

З. Анализ свойств нефиксированных эритроцитов /на основе методик количественной и качественной оценки состояния клеток/ в норме, при нарушениях ионного состава плазмы /диффузный гломерулонефрит/, содержания глюкозы /сахарный диабет/ и при нарушениях свойств мембраны эритроцитов /наследственный микросфероцитоз/

4. Сравнительная характеристика эритроцитов в норме и наследственном микросфероцитозе в исследованиях in vitro при индуцированных изменениях формы клеток от дискоидальной до сферической /количественная и качественная оценка/.

Научная новизна.

Количественные данные, полученные на препаратах без изменения нативных свойств клеток с использованием оригинальных количественных методик интерференционного анализа, указывают на однозначную взаимосвязь между формой, размерами эритроцитов, массой и концентрацией в них гемоглобина. Характер взаимосвязи одинаков для эритроцитов в норме и при наследственном сфероцитозе /НС/. Выявлено полное отсутствие истинных сфероцитов в плазме крови детей больных НС. Установлено, что увеличение сферичности эритроцитов при данном заболевании связано с уменьшением площади поверхности клеток. Исследование in vitro явления перехода эритроцитов от двояковогнутого диска к сфере в норме и при НС показало, что этот переход в обоих случаях представляет собой последовательный обратимый процесс, однако форма поверхности эритроцитов сферической формы в норме и при НС различна. Установлено, что переход от диска к сфере у эритроцитов больных НС происходит при меньших физико-химических воздействиях, что указывает на увеличенную способность эритроцитов к сферуляции при данном заболевании.

Практическая ценность.

Результаты работы, начиная с 1978 года, внедрены в практику в Той детской клинической больнице г. Москвы, применяются в научно-исследовательской работе лаборатории гормонально обменной диагностики и кафедры факультетской педиатрии 2го МОЛГМИ им. Н.И.Пирогова, лаборатории цитобиохимии МНИИ педиатрии и детской хирургии МЗ РСФСР. Результаты исследований по разработке оптической схемы голографического микроскопа для анализа фазовых объектов малых размеров. (5-10 мкм) используются в ‚научно-исследовательской работе группы “Голографическая микроскопия” ВНИИ оптик физических измерений.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 5 работ.

Апробация диссертационного материала.

Результаты работ докладывались на:

1. 4ом Всесоюзном семинаре “Физические методы и вопросы метрологии биомедицинских измерений”, Москва, 1976 г.

2. Первом Всесоюзном научно-техническом симпозиуме “Оптическое приборостроение и голография”, Львов, 1976 г.

3. Первой Всесоюзной конференции “Средства и методы квантовой электроники в медицине”, г.Саратов, 1976 г.

4. 4ой Енисейской биофизической конференции “Механизмы регуляции эритропоэза”, г. Красноярск, 1978 г.

5. Заседании гематологической секции общества педиатров г. Москвы /предс. чл.корр. АМН СССР Н.С. Кисляк/, г. Москва, 1980 г.

6. Заседаниях Научного Совета по проблеме “Голография” при АН СССР /предс. чл.корр. АН СССР Л.Д.Бахрах/, г. Москва, г. Ленинград, 1980 г.

7. Заседании Научного Совета кафедры “Физика твердого тела” Московского инженерно-физического института, г. Москва, 1981 г.

8. Заседании Ученого Совета МНИИ педиатрии и детской хирургии МЗ РСФСР /дир. проф. Ю.Е.Вельтищев/, г. Москва, 1981 г.

Структура работы.

Диссертация изложена на 176 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, трех глав собственных исследований, включающих описание методик анализа эритроцитов методами оптической голографии и экспериментальных исследований, заключения, выводов и приложения. Библиографический указатель содержит 137 источников литературы. Работа иллюстрирована 45 рисунками и 13 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

В качестве материала исследования были взяты эритроциты периферической крови здоровых /20/ и больных детей: 5 с сахарным диабетом, 6 с диффузным гломерулонефритом, 12 с наследственным микросфероцитозом в возрасте от 6 до 12 лет. Обследовались эритроциты родственников детей, больных НС. В 2х случаях анализировались эритроциты, выделенные из удаленной по поводу НС селезенки.

Забор крови производился из локтевой вены. Для анализа использовалась гепаринизированная кровь в объеме 0,5+1,0 мл, не позднее чем через час после забора крови. Эритроциты исследовались при комнатной температуре /t =20-22⁰ С/ в аутоплазме или в физиологическом растворе в зависимости от типа эксперимента. Взвесь эритроцитов разделялась на две части. Первая часть /0,1 – 0,3 мл/ помещалась под микроскоп, далее проводилось фотографирование или микрокиносъемка интерферограмм и изображений клеток в лазерном свете. Интерференционные картины, снятые на фотопленку, обрабатывались по разработанным методикам расчёта интерферограмм. Вторая часть эритроцитов /0,3 – 0,4 мл/ отбиралась для измерения на рефрактометре показателя преломления внутри и вне клеток.

Эти данные использовались для обсчёта интерферограмм. Исследования эритроцитов проводились по следующим признакам:

1. Определение максимальной и минимальной толщины, площади поверхности, объема, коэффициента сферичности эритроцитов, массы и концентрации гемоглобина, определение формы эритроцитов по их поперечному сечению, анализ изменения поверхности по данным голографической интерферометрии и лазерной микроскопии в проходящем и отраженном свете.

2. Анализ осмотической резистентности эритроцитов по методу рассеяния лазерного излучения на взвеси эритроцитов в средах различной тоничности.

3. Измерение осмотической силы плазмы и физрастворов по электротермическому методу определения осмотического давления биологических жидкостей /Жуков Б.Н. с соавт., 1972/.

4. Контроль рН физрастворов рНметром.

Обработка результатов проводилась с помощью ЭВМ и калькуляторов, полученные данные, представлялись в виде таблиц, графиков, кривых распределения числа эритроцитов от измеряемых параметров, в виде микрофотографии в лазерном свете /увеличение 2250 раз/, интерферограмм эритроцитов, кино и видеомагнитофонных записей.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Теоретическое обоснование использования методов голографической интерферометрии и лазерной микроскопии. Описание количественных методик анализа параметров эритроцитов данными методами

В основе оптической голографии лежит двухстадийньй принцип записи и восстановления объемного изображения объекта. Для записи изображения требуется наличие двух когерентных пучков света, которые обычно получают разделением луча лазера на светоделительной призме. При взаимодействии с фотослоем регистрирующей пластинки происходит одновременная фотозапись двух пучков: сигнального — прошедшего /или отраженного/ сквозь объект и опорного, прошедшего вне объекта. Результатом этого взаимодействия, зафиксированного обычным фотоспособом, является голограмма, которая несет полную информацию об объекте /и фазовую и амплитудную/. В данной работе голографический’ принцип был использован для создания оптической схемы двухлучевого интерферометра по типу Маха Цендера, в которой одно плечо интерферометра сформировано полем микрообъектива микроскопа, а второе его мнимым, голографическим изображением. 0сновной трудностью, с которой приходится сталкиваться при анализе биологических микрообъектов голографическими методами являются их малые размеры и слабое взаимодействие с излучением лазера /малый фазовый сдвиг/. Это приводит к тому, что уровень когерентных оптических шумов, возникающих в схеме, становится сравнимым с полезной информацией. Для устранения этого недостатка в схеме специально предусмотрено устройство для усреднения когерентных оптических шумов, которое позволяет получать высококачественные интерферограммы клеток размером до 5 мкм и их микрофотографии в лазерном свете /проходящем и отраженном/ с увеличением 2250 раз.

 

                                                                  

 

 

 

 

                                                                           А                                                                                                                 Б

Рис. 1. А – Интерференционные картины. Слева направо: полосы в отсутствие объекта, интерферограммы сфероцита и дискоцита, их сечения, рассчитанные по интерференционным картинам. Б – принципиальная схема расчёта сечения эритроцита по его интерферограмме /пояснение в тексте/

Интерференционные картины, наблюдаемые в окуляре микроскопа, представляют собой в отсутствие объекта чередующиеся прямые, темные и светлые полосы, которые искажаются при внесении в поле микрообъектива клеток в зависимости от их оптических свойств (Рис. 1А). Задачей анализа интерферограмм эритроцитов являлось получение количественных характеристик о размерах, форме эритроцитов, массе и концентрации гемоглобина исходя из количественной оценки оптических свойств клеток.

Отклонение интерференционной полосы ∆У (x, y) (Рис. 1,Б) возникающее при внесении в поле объектива эритроцита, определяется уравнением:

∆У (Х,У) = S /λ ∆n(x,y) T (x, y) (1)

Где: S – расстояние между интерференционными полосами вне объекта; λ – длина волны излучения лазера (λ =0,6328 мкм для гелий-неонового лазера, используемого в данной работе); ∆n(x,y) разность показателей преломления внутри и вне клетки /измеряется при помощи рефрактометра/; T (x, y) – толщина эритроцита в точке измерения отклонения интерференционной полосы.

В уравнении /1/ величина ∆n(x, y) принимается за постоянную, так как показатель преломления внутри клетки постоянен. Это объясняется тем, что эритроцит по всему объему равномерно заполнен гемоглобином. Таким образом, в уравнении /1/ величина ∆У (x, y) измеряемая по интерферограмме клетки, связана прямой зависимостью с толщиной клетки T (x, y). Рассчитав значение толщины эритроцита вдоль его диаметра, можно построить поперечное сечение клетки /Рис. 1, Б/. Исходя из осевой симметрии эритроцитов, зная его сечение, рассчитывается площадь поверхности и объем эритроцитов. Более простой способ измерения состоит в расчёте этих параметров по микрофототрафиям эритроцитов, помещенных в аутоплазму, где клетки собраны в упорядоченные группы типа “монетных столбиков” .

Построение поперечного сечения эритроцитов позволяет проводить количественную оценку формы клетки. Для этого, при описании сечения эритроцита нами были введены коэффициенты: основные a(DC), b (BD), c (ED), d (AE) численные значения которых определялись по данным интерферометрии (Рис. 2) и производные: Кϕ = (b – d)/ c – коэффициент, описывающий степень прогиба центральной части клетки. Кэл.= b/a ,описывает периферическую часть’ клетки и с/R ( R радиус) показывает относительное расстояние от центра эритроцита до точки, где толщина клетки максимальна. Эти коэффициенты были использованы в дальнейшем для оценки изменений формы эритроцитов в норме и патологии (Рис. 5).

Рис. 2. Иллюстрация к определению основных ‘параметров формы эритроцитов (пояснение в тексте)

Величины для концентрации гемоглобина и его ‘массы в эритроцитах были получены для эритроцитов, переведенных в сферическую форму. Величина ∆n связана с объемной концентрацией внутриклеточных веществ (гемоглобина)— Cv ( Feleppa ‚ 1972) . Отсюда для концентрации гемоглобина имеем: Cv = ∆n/α, где α – характеристический коэффициент, определяемый оптическими свойствами вещества.

Масса гемоглобина m, определяется как произведение концентрации гемоглобина на, объем эритроцита. Для клеток сферической формы получаются простые выражения для Сv и m

Cv = 1,344 (∆Y max/S R) (2)

m = 5,63 ∆Ymax./S (3)

Где ∆Y max — максимальное отклонение интерференционной полосы, проходящей через центр эритроцита, S — расстояние между полосами вне клетки, R – радиус эритроцита.

Наблюдение эритроцитов в проходящем и отраженном пользованием лазерного освещения, с использованием микрокиносъемки и видеозаписи , позволило получить новые данные о процессах, преобразования формы эритроцитов от диска к сфере. Интерферограммы эритроцитов, полученные при их исследовании в отраженном свете, позволили наблюдать активное движение внутри эритроцитов в переходной стадии преобразования формы клетки (Рис. 6).

Проделанные в работе расчёты разрешающей способности лазерной микроскопии, оценка чувствительности голографической интерферометрии, определение погрешностей измерений, параметров формы и массы эритроцитов, показали, что предложенные методики оценки со стояния живых, нефиксированных эритроцитов расширяют возможности традиционных методов цитологического анализа и могут быть успешно использованы для количественных и качественных исследований эритроцитов и других типов клеток.

2. Сравнительная характеристика свойств эритроцитов по данным голографической интерферометрии и’ лазерной микроскопии в норме и патологии

В этой серии исследований эритроциты в аутоплазме сохраняли нормальную форму до конца эксперимента. Нами наблюдалось наличие неоднородности в распределении эритроцитов в зависимости от диаметра. Во всех обследованных группах детей /здоровых, больных диффузным гломерулонефритом, сахарным диабетом, наследственным сфероцитозом /НС/ наблюдалось полимодальное распределение эритроцитов.

Средние значения отдельных мод не зависели от вида патологии. Было выделено 5 средних модовых значений диаметров эритроцитов: 6,75 мкм, 7,45 мкм, 8,20 мкм, 8,80 мкм, 9,40 мкм. Процентное распределение эритроцитов по этим группам показало, что в норме 51,5% клеток относятся к группе со средним диаметром 8,20 мкм. При сахарном диабете зв этой группе находится 16,0% клеток, и 63,04 со средним диаметром 8,80 мкм. При гломерулонефрите менее выражено наличие центрального пика (38,5% со средним диаметром 8,20 мкм, 32,5% 8,80 мкм). При наследственном микросфероцитозе 35,0% эритроцитов имеют средний диаметр 8,20 мкм, и значительное число клеток малого диаметра (37,5# 7,45 мкм, 27,24 6,75 мкм). В отдельных случаях вместо полимодального распределения эритроцитов наблюдались две достоверно различающиеся группы (Р <0,05).

Сравнение эритроцитов по размерам: диаметр, толщина, площадь поверхности, объем, коэффициент сферичности, по параметрам формы Кϕ, К эл. С/R , по массе и концентрации гемоглобина в клетках не выявило значительных различий между группами здоровых детей и детей больных диффузным гломерулонефритом и сахарным диабетом. Популяции эритроцитов периферической крови здоровых детей и детей больных НС достоверно различались по всем параметрам (Р‹0,05) . (Таблица 1.) кроме объема, коэффициента С/R, массы (30,9 ± 1.1 пг, 29,1± 0,8 пг) и концентрации гемоглобина в клетках (36,6± 1,45%, 38,2± 1,46%).

Таблица 1. Средние значения размеров и формы и содержания гемоглобина эритроцитов крови здоровых детей и детей больных НС.

Параметры

Диаметр

(мкм)

Толщина (мкм)

Кэл

С/R

Площадь

мкм²

Объем

мкм³

Масса Hb

(пг)

Конценетрация Hb

%

min

max

Норма

8,20 ±0,10

0,92 ±0,06

2,64 ±0,03

0,190 ±0,01

0,99 ±0,03

0,71 ±0,02

122± 2,2

74± 1,9

30,9 ± 1.1

36,6± 1,45

НС

7,41 ±0,09

1,94 ±0,16

3,52 ±0,10

0,320 ±0,02

1,28 ±0,03

0,68 ±0,02

99 ± 2,0

73± 2,2

29,1± 0,8 пг

38,2± 1,46

Эритроциты, помещенные в аутоплазму, как в норме, так и при НС наблюдались в виде дисков, собранных в “монетные столбики”. Истинные сфероциты при НС полностью отсутствовали, хотя они присутствовали в сухом мазке, как клетки уменьшенного диаметра. Средняя величина объема эритроцитов при НС практически совпадает со средней величиной объема эритроцитов в норме, а площадь поверхности снижена. Уменьшение площади поверхности эритроцитов при неизменном объеме приводит к разбуханию клеток при НС, что характеризуется сниженной величиной коэффициента сферичности: отношение площади поверхности к объему равно 1,22, в норме 1,65. Снижение коэффициента сферичности за счет уменьшения площади поверхности приводит к снижению осмотической резистентности эритроцитов при НС.

Рис. 3. Иллюстрация связи осмотической резистентности эритроцитов с коэффициентом сферичности. Пояснение в тексте.

Кривые осмотического гемолиза: Nг – число погибших эритроцитов в %, С NaCl концентрация хлористого натрия.

Распределение эритроцитов Nэ в % в зависимости от их коэффициента сферичности (S/V). Сплошная линия — норма, точечная – НС. Сдвиг кривой распределения эритроцитов в сторону меньших значений отношения S/V соответствует сдвигу кривой осмотической резистентности эритроцитов в сторону больших концентраций NaCl, что указывает на снижение осмотической резистентности при НС.

Кроме измерения средних величин методы голографической интерферометрии и лазерной микроскопии позволяют исследовать отдельные эритроциты одновременно по нескольким параметрам. Это позволяет выявлять характер соотношений между различными количественными характеристиками эритроцитов внутри популяции. Исследования показали наличие общих свойств эритроцитов в норме и при наследственном микросфероцитозе. Так, зависимость площади поверхности эритроцитов от их диаметров имеет общий вид в обоих случаях (Рис. 4).

 

Рис. 4. Зависимость площади поверхности S от диаметра эритроцитов /D/ в норме /ᴏᴏᴏᴏ/ и при НС /ххххх/.

Анализ эритроцитов по коэффициентам, характеризующим форму показал, что форма эритроцитов закономерно изменяется: с уменьшением диаметра наблюдается увеличение прогиба центральной части клеток, характеризующейся коэффициентом Кϕ, изменяется форма периферической части, которая оценивается по коэффициенту Кэл. и происходит сдвиг к центру клетки точки, в которой толщина эритроцита максимальна, уменьшается отношение С/R. При уменьшении диаметров эритроцитов от 9,40 мкм до 6,75 мкм величина, Кϕ увеличивается от 0,14 до 0,35, величина Кэл. увеличивается от 0,6 до 1,7, а отношение С/R уменьшается от 0,72 до 0,55 (Рис.5,А,Б,В)

Масса и концентрация гемоглобина в эритроцитах также изменяется в зависимости от диаметров эритроцитов и имеет одну и ту же закономерность как для нормы, так и для НС: с уменьшением диаметров эритроцитов наблюдается уменьшение их массы и увеличение концентрации гемоглобина в клетках (Рис. 5, Г, Д).

Рис. 5. А,Б,В – Зависимость параметров формы (Кэл, Кϕ, С/R); Г, Д – массы (m) и концентрации гемоглобина (Cv) от диаметров (радиусов) эритроцитов (D, R ) в норме (++++++) и при наследственном сфероцитозе (……..) Пояснения в тексте.

Теоретический анализ количественных экспериментальных данных показал, что изменения площади поверхности, объема, массы и концентрации гемоглобина, наблюдаемые при уменьшении диаметров эритроцитов по-видимому, могут быт., объяснены с помощью учета последствий отщепления от поверхности эритроцитов микропузырьков определенного размера. С помощью расчётов установлено, что для изменения площади поверхности, объема, массы гемоглобина и его концентрации в эритроците со средними параметрами в норме до состояния со средними параметрами при наследственном сфероцитозе потребуется порядка 20 отщеплений микропузырьков со средним радиусом Rj =0,34 мкм. При этом сохраняются все количественные соотношения параметров эритроцитов, полученные в эксперименте. Теоретический анализ показал, что в отщепляющихся микропузырьках может находиться гемоглобин в концентрациях, меньших, чем в исходной клетке, при этом после каждого отщепления объемная концентрация гемоглобина ( Cv в %) в эритроците возрастает.

Сравнение результатов анализа эритроцитов методами голографической интерферометрии и лазерной микроскопии с литературными данными показало, что величина среднего диаметра эритроцитов (8,20 мкм) соответствует данным, полученным при измерениях эритроцитов в плазме. Измеренные новым методом средние величины площади поверхности и объема эритроцитов несколько ниже данных, имеющихся в литературе. Это объясняется тем, что при измерениях площади поверхности и объема эритроцитов традиционными методами не учитываются особенности формы эритроцита, а их форма экстраполируется в общем случае к форме цилиндра (Тодоров И., 1961, Мосягина Е.Н., 1969). Данные о средних величинах массы и концентрации гемоглобина в эритроцитах хорошо согласуются с результатами, полученными при измерениях этих параметров другими методами (Козинец Г.И., соавт., 1978).

Имеющиеся в литературе сведения о полимодальной структуре распределения эритроцитов человека по диаметру в норме (Вергунова 3.И., 1979), подтверждены в данной работе для эритроцитов в норме и патологии.

Количественная оценка изменений формы, площади поверхности эритроцитов, массы и концентрации гемоглобина в клетках дополняет имеющиеся в литературе сообщения об изменениях, происходящих с эритроцитами в процессе старения. Показано, что при старении эритроцитов наблюдается уменьшение его диаметра (Бриллиант М.Д. ‚1979), изменение формы клеток (Gonsoni е.a.,1976), возрастание концентрации гемоглобина (Seaman е.а., 1977).

Известные данные о решающей роли фрагментации поверхности эритроцита в процессах старения (Рябов б.И., 1971) дают основания для проведения теоретического анализа влияния процесса отщепления микропузырьков от поверхности эритроцитов на изменение его свойств. Результаты теоретических расчётов согласуются с экспериментальными данными, что может служить еще одним подтверждением в пользу представлений о роли фрагментации поверхности эритроцитов в процессе их жизнедеятельности. Результаты исследований, проведенных методами голографической интерферометрии и лазерной микроскопии, хорошо согласуются с современными представлениями об эритроците, что служит доказательством достоверности результатов. Данные о наличии общих свойств эритроцитов для нормы и патологии указывают на существование единого механизма, под действием которого происходит изменение эритроцитов при различных условиях их жизнедеятельности.

Результаты исследований, проведенных методами голографической интерферометрии и лазерной микроскопии, хорошо согласуются с современными представлениями об эритроците, что служит доказательством достоверности результатов. Данные о наличии общих свойств эритроцитов для нормы и патологии указывают на существование данного механизма, под действием которого происходит изменение эритроцитов при различных условиях их жизнедеятельности.

3. Голографическая интерферометрия и лазерная микроскопия эритроцитов in vitro

В этой серии экспериментов исследовались эритроциты в норме и эритроциты детей больных наследственным микросфероцитозом (НС). Для облегчения расчётов и единообразия получения результатов анализ эритроцитов, помещенных в аутоплазму, проводился при условиях, когда клетки находились в виде “монетных столбиков”, при этом истинных микросфер при НС не наблюдалось.

Рис. 6. Кинограмма интерференционных картин эритроцитов в отраженном лазерном свете. Время между кадрами 1 сек. (Движение внутри эритроцитов наблюдается по смещению интерференционных полос).

При разведении аутоплазмы изотоническим раствором NaCl в соотношении 1:1 и 1:5 в условиях изотонии как в норме, так и при НС, наблюдался распад “монетных столбиков” на отдельные клетки нормальной формы (двояковогнутый диск). Дальнейшее разведение аутоплазмы 0,9% раствором NaCl (1:2 и 1:8) приводило к появлению эритроцитов с выступами по краям и отдельными неровностями на поверхности. При разведении аутоплазмы (1:1О и более) происходило увеличение неоднородности поверхности эритроцитов, изменение их формы до эллипсоидальной и далее осуществлялся переход эритроцитов в сферическую форму. С помощью микрокиносъемки в отраженном лазерном свете было показано наличие интенсивного внутриклеточного движения в эритроцитах, находящихся в переходном от диска к сфере состоянии. (Рис. 6). Анализ размеров исходной формы двояковогнутого диска и конечной (сферической) показал, что изменение формы клеток сопровождается уменьшением их диаметра и площади поверхности в норме и при НС (Р<0,01), а объем при этом достоверно не изменяется.

Уменьшение общей площади поверхности эритроцитов, отмечаемое по данным интерферометрии, объясняется, по-видимому, тем, что сферуляция сопровождается образованием микровыростов, малые размеры которых не могут быть количественно учтены данным методом. Нами наблюдалось два типа сфероцитов: шиповидные с выростами на поверхности и игольчатые, с исчерченной поверхностью, без выростов.

Первый тип отмечался в основном у эритроцитов крови здоровых детей, второй у эритроцитов больных НС. Было показано, что процесс перехода от диска к сфере обратим: при переносе эритроцитов сферической формы в аутоплазму они восстанавливают свою форму до двояковогнутого диска, что подтверждается данными сканирующей электронной микроскопии (Denhcke, 1968, Weed Besis, 1973).

Для проведения сравнительной характеристики эритроцитов в норме и при НС по признаку сферуляции было выбрано два основных разведения плазмы (1:5 и 1:1О), при которых проводился анализ распределения эритроцитов в зависимости от их формы (таблица 2).

Таблица 2. Процентное распределение эритроцитов в зависимости от их формы при двух разведениях плазмы изотоническим раствором (1:5 и 1:1О) в норме и при наследственном сфероцитозе ( НС)

Тип крови

Разведение

плазмы

Нормоциты

%

Промежуточные формы %

Сфероциты

%

Норма

1 : 5

89,5

10,5

0

1 : 10

50,0

18,5

32,5

Наследственный

микросфероцитоз

1 : 5

0

22,0

78,0

1 : 10

0

0

100

Сравнение полученных данных показало, что эритроциты больных НС переходят от формы двояковогнутого диска к сфере при меньших развелениях аутоплазмы изотоническим раствором NaCl по сравнению с нормой.

Переход эритроцитов в сферическую форму наблюдался также при механическом воздействии на клетку, так же при добавлении гетерогенной сыворотки. Эритроциты, выделенные из селезенки сразу после ее удаления по поводу НС, также имели сферическую форму.

Второй тип изменений формы эритроцитов имел место при разведении взвеси эритроцитов изотоническим раствором глюкозы. При этом наблюдалось общее искажение формы эритроцита, образование утолщения по краям, нарушение симметрии формы эритроцитов.

Третья группа изменений формы эритроцитов имела место при анализе клеток, предварительно подвергшихся аутогемолизу ( t =37 градусов по С) , 5-6 часов).Эритроциты при разведении аутоплазмы изотоническим раствором NaCl исследовались в микроскопе с лазерным освещением. Клетки имели искаженную поверхность, на которой постепенно

выбухали микропузырьки. Они некоторое время сохраняли связь с эритроцитами в виде жгутиков, а затем полностью отделялись от клеток.

Полученные данные можно представить в виде схемы (Рис. 7), в которой показаны три пути изменения размеров и формы эритроцитов. Причем, если первый и третий пути являются в принципе обратимыми, то второй путь необратим, вследствие потери части поверхности клетки в виде микропузырьков.

Рис. 7. Основные типы изменений формы и размеров эритроцитов. (Пояснение в тексте.)

Исследованные типы изменений формы эритроцитов хорошо согласуются с классификацией, предложенной на основе анализа клеток по данным электронной микроскопии (Козинец Г.И., соавт., 1979) но по данным голографической интерферометрии и лазерной микроскопии размеры эритроцитов значительно отличаются от результатов, полученных методом растровой электронной микроскопии, так как при обработке эритроциты уменьшаются в размерах (Крымский Л.Д. ‚соавт., 1976).

Исследование новыми методами динамики перехода формы эритроцита от диска к сфере и явления отщепления микропузырьков от поверхности клеток представляет значительный интерес, так как по современным данным эти явления лежат в основе того многообразия форм и типов эритроцитов, наблюдаемых с помощью электронномикроскопических методов в норме и патологии. Показано, что сферуляция эритроцитов может происходить in vitro как при действии различных веществ ( La Selle e. а. ,1980), так и пря взаимодействии с макрофагами ( Guerry е.а. , 1967). Длительное хранение эритроцитов также в конечном итоге приводит к изменению формы эритроцитов до сферической (Крымский Л.Д., соавт., 1976). Сфероциты отмечаются при различного рода анемиях и других заболеваниях, приводящих к нарушению свойств эритроцитов (Идельсон Л.И., 1979). Таким образом, явление сферуляции, наблюдаемое как in vivo так in vitro является единым ответом клетки на разнородные воздействующие факторы. С другой стороны, показано, что нормальная селезенка, задерживает сфероциты независимо от того, врожденное это или искусственно созданное изменение эритроцитов (Канаев С.В., Тушинская М.М., 1979/. В связи с вышеизложенным представляет интерес тот факт, что эритроциты при НС хотя и не имеют форму сферы, однако переход от диска к сфере при данном заболевании происходит при более слабых воздействиях по сравнению с нормой.

Результаты работы показали, что такие сложные процессы как явление сферуляции эритроцитов и отщепление микропузырьков от поверхности могут быть прослежены в динамике методами голографической интерферометрии и лазерной микроскопии. Оценка этих сложных явлений новыми методами углубляет представления о процессах жизнедеятельности эритроцитов периферической крови.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Количественная оценка состояния эритроцитов в норме и патологии, проведенная методами голографической интерферометрии и лазерной микроскопии в проходящем и отраженном свете показана эффективность использования данных методов для анализа эритроцитов, позволило в количественном виде выразить общие закономерности изменения размеров и формы эритроцитов, массы гемоглобина и его концентрации в клетках вне зависимости от патологии. Применением новых методов с использованием микрокиносъемки и видеозаписи позволило на нефиксированных клетках проследить основные виды преобразования формы и размеров эритроцитов образования микропузырьков на поверхности эритроцитов и перехода от диска к сфере и дать им количественную оценку.

В результате проделанной работы была разработана схема голографического интерференционного микроскопа, выявлены достоинства метода (возможность количественной оценки нефиксированных клеток), и недостатки (трудоемкость обработки данных), указаны пути улучшения прибора: введение электронного устройства съема оптической информации и ввода ее в ЭВМ). Разработаны методики интерференционного анализа эритроцитов.

Методы голографической интерферометрии и лазерной микроскопии в значительной степени дополняют традиционные микроскопические методы исследования: анализ клеток в проходящем свете, методы темного поля и фазового контраста, они обладают рядом преимуществ, расширяющих возможности оптической микроскопии. Анализ интерферограмм эритроцитов позволяет проводить количественную оценку формы клеток вводя соответствующие коэффициенты, вычислять площадь поверхности и объем эритроцитов. Одновременно можно измерять массу гемоглобина и его концентрацию. Голографический микроскоп позволяет наблюдать клетки в проходящем лазерном свете и выявлять наличие неоднородностей в клетках. Микрокиносъемка интерферограмм эритроцитов в отраженном лазерном свете позволяет следить за преобразованиями формы и поверхности клеток. Качественная и количественная оценка объектов исследования может проводится без их окраски и фиксации, что позволяет проводить анализ клеток в динамике.

ВЫВОДЫ

1. На основе отечественной аппаратуры создан оригинальный макет голографического микроскопа, который дает возможность методами интерферометрии и лазерной микроскопии проводить количественную и качественную оценку состояния эритроцитов в динамике.

2. Получены экспериментальные данные, позволяющие в количественном отношении анализировать форму эритроцитов, измерять площадь поверхности, объем клеток, массу гемоглобина и его концентрацию в эритроцитах без их окраски или фиксации, что дает возможность изучать в динамике процессы сферуляции эритроцитов и отцепление микропузырьков от поверхности эритроцитов.

3. Анализ параметров поперечного сечения эритроцитов и их интерферограмм позволил выявить следующие закономерности:

а) при уменьшении диаметра эритроцитов происходит изменение формы центральной и периферической части клеток и сдвиг максимальной толщины к центру.

6) с уменьшением диаметра эритроцитов наблюдается уменьшение площади поверхности клеток и массы гемоглобина, увеличение его объемной концентрации.

в) распределение эритроцитов в зависимости от их диаметров носит полимодальный характер с наличием пяти пиков. Эти закономерности характерны для эритроцитов как в норме, так и при патологических состояниях.

4. Не показано достоверных различий между эритроцитами в ‘норме при диффузном гломерулонефрите и сахарном диабете по измеренным параметрам. Эритроциты больных наследственным сфероцитозом в аутоплазме имеют форму утолщенных двояковогнутых дисков с уменьшенной площадью поверхности и неизменным объемом, что соответствует снижению коэффициента сферичности клеток при данном заболевании по сравнению с нормой.

5. Наблюдаемое в эксперименте изменение формы эритроцитов от дискоидальной до сферической представляет собой обратимый процесс, который сопровождается уменьшением общей площади поверхности без значительного изменения объема. Этот переход не зависит от природы действующего фактора и является специфической реакцией эритроцитов на внешние воздействия. Эритроциты при наследственном микросфероцитозе переходят в сферическую форму при меньших по сравнению с нормой воздействиях на клетки.

СПИСОК РАБОТ ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Изучение гемолиза эритроцитов методам голографической интерферометрии. Гинзбург В.М., Метелкин А.Н., Степанов Б.М., Ионов Б.В., Чернух А.М. В сб. Научные труды МИРЭА — М., 1977, вып. 9, с. 146-151.

2. Метелкин А.Н. Особенности исследования геометрических свойств живых клеток методом голографической интерферометрии. В с6. Научные труды ВНИИФТРИ. М., 1976, стр. 40-46.

3. Метелкин А.Н., Ионов Б.В. Применение голографической интерферометрии для изучения биомедицинских микрообъектов. В сб.: Средства и методы квантовой электроники в медицине.

Саратов, Изд-во Саратовского ун-та, 1976, с. 193-194.

4. Метелкин А.Н. Определение размеров эритроцитов методом голографической интерферометрии. В сб.: Четвертая Енисейская биофизическая конференция “Механизмы регуляции эритропоэза”. Тез. док. Красноярск, 1978, с. 141-142.

5. Метелкин А.Н., Манин В.Н., Румянцев А.Г. Анализ формы и размеров эритроцитов при наследственном сфероцитозе и у здоровых детей методом голографической интерферометрии. Педиатрия, 1980, №5, с. 4345.

Подписано к печати 23.07.81г. Л-78853. Тир130. Зак.14507. Отпечатано на ротапринте во ВНИИОФИ.

О регуляторных механизмах изменений формы эритроцитов человека. Часть 1. А.Метелкин 20.02.2022

О регуляторных механизмах изменений формы эритроцитов человека. Часть 1.

А.Н. Метелкин

Аннотация

Собраны материалы работ, выполненных сотрудником ВНИИ оптико-физических измерений в области голографической микроинтерферометрии, телевизионной микроскопии и лазерной нефелометрии эритроцитов. Работы выполнены на клинической базе Второго МОЛГМИ им Н.И.Пирогова, в ДКБ № 1 (Морозовская больница). По результатам исследований предложена модель развития эритроцитов от молодой клетки, ретикулоцита, до утилизации старых клеток в селезенке. Показана связь между изменением формы клетки, вызванной фрагментацией мембраны эритроцита и переходом от диска к сфере. Сферулизация, как маркер ослабления клетки и сигнал для ее утилизации. Показана независимость перехода от диска к сфере от природы действующих факторов. Это позволяет предположить наличие единого механизма утилизации ослабленных клеток, вне зависимости от природы нарушений. В отраженном лазерном свете, впервые были зафиксированы колебания поверхности эритроцитов, что может пролить свет на реологические свойства клеток. Из наблюдений за поведением эритроцитов in vitro предложена гипотеза о трансформации эритроцита в малый лимфоцит.

Оглавление

  1. Глава 1. Записки голографического биофизика
  2. Глава 2. Методы. Голографическая микроинтерферометрия, телевизионная микроскопия и лазерная нефелометрия живых эритроцитов человека
  3. Глава 3. Механизмы изменения параметров эритроцитов в процессе жизнедеятельности.
  4. Глава 4. Гипотеза о трансформации эритроцита в малый лимфоцит

Приложение 1. А.Н. Метелкин Динамические характеристики живых эритроцитов . Тезисы доклада. Юбилейная сессия Российской академии естественных наук «ЛЕОНАРДО ДА ВИНЧИ ХХ ВЕКА». Москва, 1997г.

Глава 1. Записки голографического биофизика

Мои благодарности

Данная работа – совместный труд коллектива ученых, врачей инженеров и физиков, которые принимали активное участие в обсуждении результатов, предлагали пути решения. Совместные публикации показывают широкий круг специалистов, вовлеченных в тему.

Я благодарен директору нашего института, ВНИИ оптико-физических измерений, профессору Борису Михайловичу Степанову, за то, что предоставил абсолютную свободу для творчества, всегда помогал в трудные периоды, поддерживал и ободрял. Он подписывал все мои письма до уровня министерств, и наша небольшая группа была обеспечена самым современным по тем временам оборудованием. Заведующая голографической лабораторией Вера Моисеевна Гинзбург, впоследствии «бабушка советской голографии», так же оказывала помощь и поддержку, принимала живейшее участие в обсуждении результатов.

Огромная благодарность и признательность ученым из Института Атомной Энергии им. Курчатова, А. Петрову и Н. Бонч-Осмоловскому. Они сами предложили мне свою помощь и провели ряд уникальных исследований по расшифровке фазовых функций эритроцитов.

Отдельная благодарность Станиславу Филипповичу Чалкину, сотруднику филиала Института Атомной Энергии в Троицке. Он постоянно курировал весь процесс внедрения в практику лазерных технологий, обеспечил финансирование ряда проектов.

Медицинская и научная часть работ была обеспечена и поддержана врачами и научными сотрудниками Второго МОЛГМИ им. Н.И. Пирогова (ныне РНИМУ им. Н.И. Пирогова) и специалистами Морозовской больницы. Огромная признательность за дружескую поддержку выражаю Александру Гавриловичу Талалаеву. В то время он возглавлял морг Морозовской больницы, чьи подвалы и приняли нашу группу и большую массу технического оборудования. Наши беседы и встречи всегда были заряжены позитивом и положительной энергией. Это значительно облегчало трудности работы на стыке физики и медицины. Кафедра факультетской педиатрии, ее руководитель, гематолог, профессор, Наталья Сергеевна Кисляк, старший научный сотрудник кафедры Александр Григорьевич Румянцев, их неоценимые советы и рекомендации позволили определить главные направления работ в области гематологии.

Выражаю благодарность и директору Московского научно-исследовательского института педиатрии и детской хирургии Министерства здравоохранения РСФСР, профессору, д.м.н. Юрию Евгеньевичу Вельтищеву. Он активно поддержал исследования и направил своего аспиранта, который подтвердил своими результатами важность диагностического признака разделения эритроцитов на отдельные группы. Результаты были получены методом лазерной нефелометрии.

Это далеко не полный список, тех. Кто помогал в работе. В те времена атмосфера дружеского участия и заинтересованности были главными факторами поддержки в работе.

История вопроса

Часть 1. ВНИИОФИ.

Целью книги является публикация материалов, которые не нашли отражения в научной периодике по различным причинам: сначала шла работа по поиску методов и средств диагностики, потом шло накопление результатов, а потом СССР развалился и работы были остановлены.

Так вышло, что после биофака МГУ, с кафедры биофизики я, каким-то неведомым мне чудом, оказался во ВНИИ оптико-физических измерений. Это был научный институт чисто технический, который имел по тем временам хорошее финансирование, имелась современная измерительная аппаратура, деловые контакты с ведущими физическими институтами – ФИАН, ИАЭ, МИФИ, ГОИ ЛОМО и ЛИТМО. Тем не менее в институте не было биологии никакой, а были гелий-неоновые лазеры ЛГ-38 и была голографическая лаборатория под руководством д.т.н. Веры Моисеевны Гинзбург. В то время она курила Беломор, она прошла фронт и участвовала в качестве радистки в Сталинградской битве. Позже, она нам рассказала, что от битвы у нее в памяти сохранились только два воспоминания: непрерывный грохот разрывов снарядов и бомб не давал заснуть, и, пыль от битого красного кирпича, которая проникала везде и нечем было дышать.

Когда мне оформили документы, и я был принят на работу на должность инженера с окладом 110 рублей плюс премия, я начал задавать вопросы, а кто мне будет ставить задачи, кто мой руководитель? Вера Моисеева мне радостно заявила, что я, как биофизик, буду в голографической лаборатории заниматься внедрением голографии в биологию: био и физик…А как это? На этот вопрос мне никто не ответил и жизнь понеслась, меня зачислили в группу, вся лаборатория была поделена на группы. Мой начальник, мало чем мог мне помочь, и я несколько лет учился голографии, мистической области физики, которая давала объемные изображения людей, всего чего угодно.

Тот период был крайне болезненный, поскольку я хорошо понимал, что я голографию в биологию никак не внедрю, если сам, именно сам, без какой-либо поддержки не найду выход. Обстановка в лаборатории была вполне демократической: кто хотел бездельничать, тот бездельничал, мог работать через пень колоду, кто хотел и мог работать, двигать науку, тот был полностью поглощен свой работой и получал реальные результаты. Наш институт занимался не только голографией, но и фотоникой, наукой о сверхскоростной фотографии, физики работали в области сверхнизких световых сигналов и ловили отдельные кванты света.

Первый успех заключался в том, что основным методом количественной оценки физических объектов, практически любых, прозрачных и непрозрачных, была голографическая интерферометрия, если добавить к этой науке микроскоп и мы погружаемся в мир фазовых, прозрачных объектов. Когда я собрал первый свой голографический интерференционный микроскоп с увеличением объектива Х 40, то начал судорожно искать фазовые прозрачные объекты. Пошел на биофак на кафедру физиологии животных и был там награжден лягушачьей икрой и гидрами. Первые интерферограммы меня воодушевили. На фотографиях были видны четкие интерференционные полосы, которые позволяли видеть в прозрачном объекте внутреннюю структуру. Примерно в это время у меня появились первые доклады на научных конференциях.

Следующим шагом было найти из множества биологических объектов, тот который бы был наиболее информативным и давал именно реальную пользу для биологии и медицины. Я уже освоился с лабораторией завел дружбу с наиболее сильными специалистами по голографической интерферометрии макрообъектов. И засел за книги в Ленинке, в отделе «биология». И тут я открыл для себя книгу Чижевского про эритроциты и их микроскопические наблюдения. Эти работы так меня потрясли своей простотой и доступностью изложения, что я «заболел» эритроцитом и под него стал собирать голографический интерференционный микроскоп. Это было моё твердое решение: продолжить работы по изучению живых эритроцитов без их обработки in vitro и попробовать из этих данных получить картину поведения эритроцитов in vivo .. то есть описать поведение эритроцитов в русле крови от их зарождения до их утилизации. Мне это удалось и базовые результаты были опубликованы много позднее в трудах конференции МГУ, посвященной Чижевскому. Название конференции: «Чижевский, Леонардо 20го века».. (Приложение 1).

Часть 2. Морозовская больница, Второй МОЛГМИ и все, все, все.

Руководство института дало добро на создание небольшой научной группы в медицинском учреждении для проверки моих замыслов. Этим учреждением оказалась именно Морозовская больница. Я, уже младший научный сотрудник, попал на прием к главврачу больницы в поисках места, где можно было разместить голографические стенды для научных исследований. Главврач мне посоветовал обратиться в патологоанатомическое отделение, которое сравнительно недавно въехало в новое, недавно построенное здание, где были полуподвалы совершено пустые. Так я попал в морг Морозовской больницы и познакомился с удивительным коллективом детских патологоанатомов.

Мое знакомство с Александром Гавриловичем Талалаевым произошло так: я зашел в здание морга, окрыленный идеей организации научной лаборатории, я летел на крыльях, спросил у старшей сестры, где начальник, она мне ответила, что он в 17 комнате. Я начал на дверях читать номера комнат, дошел до 17ой открыл… и тихо охнув, пискнув «извините», как-то боком вышел, выполз, мне стало дурно. Впоследствии Александр Гаврилович долго смеялся надо мной, и меня успокоил, один человек японского происхождения просто описался, когда неожиданно заглянул… в прозекторскую. (специальная комната для вскрытия в морге).

По мере развития темы у меня появилось масса научных контактов не только во Втором МОЛГМИ (Морозовская больница была клинической базой этого института), меня познакомили с Юрием Евгеньевичем Вельтищевым, директором Московского научно-исследовательского института педиатрии и детской хирургии Министерства здравоохранения РСФСР, в то время остро встала проблема ожирения у детей и мне пришлось исследовать жировые клетки крыс, было выполнено исследование эритроцитов кровы у детей с патологией почек. Наиболее важные научные результаты были получены после моих контактов с педиатрами гематологами. Тогда Александр Григорьевич Румянцев был старшим научным сотрудником, и мы с ним плотно контактировали по при обсуждении результатов работ. Кафедра факультетской педиатрии, ее руководитель, профессор Наталья Сергеевна Кисляк проводила регулярные научные семинары, и я на них часто присутствовал и делал короткие доклады по результатам работ.

Часть 3. In vitro. Фазовые объекты, это просто.

Немного физической оптики клеток крови. Дело в том, что у светового микроскопа есть два недостатка: обычный оптический микроскоп видит тени клеток крови, если их рассматривать в капле физраствора. Клетки тканей практически прозрачны для видимого света. Второе ограничение, критерий Релея, это ограничение в разрешении микроскопа. То есть мелкие детали, меньше чем 0,2 мкм в микроскоп разглядеть нельзя. Для того, чтобы эритроцит рассмотреть его нужно покрасить краской и высушить. При этом его размеры изменяются, исключаются наблюдения за живой клеткой. Так, во всех учебниках по гематологии диаметр эритроцита считается 7,4-7.6 мкм , в капле физраствора его размеры 8,2 – 8,4 мкм и это его истинные размеры.

С точки зрения физической оптики крови, эритроцит, это прозрачный объект, такие объекты называют фазовыми. Дело в том, что человеческий глаз, наш оптический элемент, так устроен, что они чувствует интенсивность света в огромном диапазоне и у него есть чувствительные элементы, которые различают цвет. Фазу глаз не видит. Не дано. А фазовые объекты оптики научились видеть с помощью интерференции, когда на фоне прозрачного объекта появляются интерференционные полосы связанные с возмущением фазы проходящего через объект света. Для понимания дальнейших рассуждений этого достаточно.

In vitro, это такой род исследований при котором клетки изымаются из организма, определенным образом обрабатываются, измеряются и делается анализ крови на предмет диагностики какого либо заболевания или для научных исследований свойств этих клеток. Применяется окраска цветными и флуоресцентными красителями, в последнем случае клетки можно изучать в капле и смотреть за динамикой процесса. В ходе научных исследований постепенно накапливается материал, который позволяет перенести данные о клетках изученных in vitro на состояние этих клеток внутри организма то есть in vivo..

Не вдаваясь в аппаратурные особенности устройства голографического интерференционного микроскопа, который был собран по схеме Маха-Цендера, скажу только, что для его работы пришлось изготовить специальный голографический стенд с антивибрационной плитой весом в полторы тонны. Плита была подвешена на огромных толстых стойках. В качестве антивибрационной развязки использовалась воздушная подушка из толстой резины. На этой плите и собиралась оптическая схема. В схеме использовался обычный оптический микроскоп, который был встроен в интерферометр. Были применены максимальные увеличения: объектив х100 и окуляр х20 то есть было общее увеличение в 2000 крат.

Глава 2. Методы. Голографическая микроинтерферометрия, телевизионная микроскопия и лазерная нефелометрия живых эритроцитов человека

Все основные результаты изложены в диссертации: А.Н. Метелкин «Голографическая интерферометрия и лазерная микроскопия эритроцитов». В данной публикации мы рассмотрим методики измерения и количественные характеристики эритроцитов.

Нашей группе были созданы благоприятные условия работы: хорошее финансирование, закупалась современная измерительная аппаратура, налажены деловые контакты с ведущими физическими институтами – ФИАН, ИАЭ, МИФИ, ГОИ ЛОМО и ЛИТМО. Была предоставлена относительная свобода в выборе тематик. ВНИИОФИ институт-разработчик измерительной аппаратуры имел экспериментальную базу для разработки приборов, построенную по принципу детского конструктора с набором унифицированных элементов и комплектующих для удобства макетирования: стенды с набором оптико-механических узлов для прецизионного крепления и юстировки элементов схемы, лазеры, как источники излучения, фотодетекторы: ФЭУ, ФД, сканеры и телекамеры, современная аналоговая аппаратура и вычислительная техника. Все это позволяло добиваться оптимальных результатов в короткие сроки. Были разработаны и испытаны в условиях клиники: голографический интерференционный микроскоп, лазерный телевизионный микроскоп с видеозаписью в проходящем и отраженном свете, лазерный нефелометр

Часть 1. Голографический интерференционный микроскоп.

Рис. 1 Серийный образец микроскопа голографического интерференционного.

Голографический микроскоп по типу двухлучевого интерферомета Маха-Цендера был разработан в нескольких вариантах, последний предполагал ввод информации в ПК.

G:\Книга 2022 Голография\АА Зписки биофизика\golmikr.jpg

Рис. 2. Принципиальная схема голографического интерференционного микроскопа и средства визуализации и обработки интерферограммы: Л1 и Л2 – линзы коллиматора, РЩ – регулируемая щель и СУ-система усреднения когерентных шумов, Д – светоделитель, З-1, З-2, З-3 – поворотные зеркала, К-1 и К-2 – кондесоры, Об.-1 и Об.-2 – микрообъективы. Интерференционная картина передается с помощью телекамеры на монитор и вводится в ЭВМ для последующей обработки.

C:\Users\admin\AppData\Local\Microsoft\Windows\INetCache\Content.Word\20211105_214648.jpg

Рис. 3 Интерферограммы двух форм эритроцитов: дискоцита и сфероцита.

Рис. 4. Параметры формы профиля эритроцита, нормоцита.

C:\Users\admin\AppData\Local\Microsoft\Windows\INetCache\Content.Word\rbs_phaza.tif

Рис. 5. Фазовая функция отражающая наличие микровыростов на поверхности эритроцита: предгемолитическая фаза. Материалы получены совместно с учеными ИАЭ им. Курчатова.

Методика измерения.

Исследовалась венозная гепаринизированная кровь доноров, консервированная кровь и кровь больных с различными нозологиями (обменного характера сахарный диабет, пневмония, и с наследственными нарушениями мембраны -наследственный микросфероцитоз) при различных состояниях больных: в разгар заболевания, в условиях реанимации и в процессе выздоровления. Кровь для микроскопирования бралась на гепарине и разводилась изотоническим раствором NaCl. Исследования проводились не позднее, чем через 1 час после забора крови. Применялось максимальное для световой микроскопии увеличение: Об. х90, Ок. х25.

Данные о параметрах клетки статистически обрабатывались и сопоставлялись между собой (Таблица 1).

 

Таблица 1 Сравнительные характеристики в норме и при наследственном микросфероцитозе:

НОРМА Н. СФЕРОЦИТОЗ

1.Диаметр D -(МКМ) 8,2 7,4

2.Толщина(МКМ):

максимальная H 2,6 3,5

минимальная h 0,9 1,9

3.Параметры формы:

Кфи 0,2 03,2

Кэл. 0,99 1,28

2

4.Площадь поверхности S (МКМ ) 122 99

3

6.Объем V (МКМ ) 74 73

7.Коэффициент сферичности:

K = S/V 1,65 1,22

7.Сухая масса m (ПГ) 31_ 1 29_1

8.Концентрация C Hb (%) 36,6_1,5 38,5

C = m/V x 100%

 

Достоверных различий во всех параметрах между нормой, пневмонией и сахарным диабетом при различных степенях тяжести заболеваний не отмечено.

Часть 2. Телевизионный микроскоп в проходящем и отраженном свете.

Микроскопия в проходящем лазерном и обычном свете

Рис. 6. Макет телевизионного оптического микроскопа с выводом на монитор и видеомагнитофон. Хорошо видны различные формы эритроцитов в предгемолитической фазе: сфероциты с шипиками.

Рис. 7. Микрофотография брыжейки крысы снятая в остром опыте.

Микроскопия в отраженном лазерном свете.

Рис. 8. Интерференционная картина от двух стенок верхней и нижней, полученная в отраженном лазерном свете.

Был использован серийный микроскоп МБИ-15 с гелий-неоновым лазером в качестве источника освещения.

Наблюдались колебания интерферограмм эритроцитов.

Рис. 9. Последовательная фотосъемка одной клетки с интервалом 1 сек. Видны различия форм интерферограмм.

Часть 3. Лазерная нефелометрия эритроцитов.

Описание нефелометра

       Лабораторный образец лазерного нефелометра был собран на основе He-Ne лазера мощностью 1 мвт  (Рис. 1). При создании прибора были выполнены предварительные исследования индикатрис рассеяния, выполнен расчёт однократности рассеяния от взвеси эритроцитов в изотоническом растворе NaCl. Одновременно проводились исследования живых эритроцитов методами голографической миктоинтерферометрии и лазерной микроскопии . Результаты  исследований били использованы для интерпретации данных по лазерной нефелометрии .
       Для измерения светорассеяния взвесь  эритроцитов в  растворе NaCl с различной тоничностью  помещалась в цилиндрическую кювету с магнитной с мешалкой. В результате исследований выявилась гетерогенность популяции эритроцитов , которая коррелировала  со степенью тяжести заболевания in vivo и состоянием крови  in vitro.

 

Рис.10. Схема лазерного нефелометра для измерения интенсивности рассеянного лазерного света от суспензии эритроцитов. 

   Материалы

 В качестве объекта исследования бралась гепаринизированная кровь из локтевой вены в норме и при патологиях Обращалось внимание на то , чтобы время между забором крови и началом измерения не превышало  одного часа . На этапе отработки методики проводились исследования на крови животных – кроликов.

Методы

Описание методики:
     
    За основу была взята методика оценки осмотической резистентности эритроцитов при которой взвесь эритроцитов инкубировалась в течение часа в растворах NaCl с различной тоничностью: исходная концентрацией NaCl = 0,9 %   конечная – 0 %. Через час инкубации в пробирках происходил осмотический гемолиз эритроцитов, который регистрировался с помощью нефелометра. Фототок ФЭУ был пропорционален концентрации эритроцитов ( 6 ).
     Результаты анализировались в графическом виде . График осмотического гемолиза  эритроцитов выражает зависимость числа гемолизированных эритроцитов (в  %)  от осмотической силы раствора  (Конц. NaCl ) . При построении графиков обнаружено наличие   «горбов»  на S-образной кривой  которые интерпретировались нами как неоднородность популяции  эритроцитов и были измерены в количественном виде Рис. 2 .

 

 Рис. 11. График зависимости осмотической резистентности    эритроцитов от тоничности раствора NaCl. (На графике выделяются три групп клеток – слабые, средние и сильные.

Результаты. 

Тестирование метода выполнено на донорской крови: выявлено наличие трех групп эритроцитов

  1.Анализ донорской крови по группам: слабые, средние, сильные.

Исследовалась кровь взрослых доноров СПК КБ № 6 (17 чел.).
 
 Статистический анализ данных показал следующее:
1.  Наиболее вероятное число субпопуляций  – три . Среднее содержание эритроцитов по группам: слабые – 11%, средние – 39%, сильные – 50%.
2.   Границы  зон гемолиза   трех субпопуляций не зависят от крови донора и располагаются следующим образом: слабые клетки лизируются в зоне от 0,9% до 0,71% , средние – 0,71%-0,54%, сильные – 0,54% – 0% NaCl/

  2.Аутогемолиз донорской крови:

Донорская кровь инкубировалась при температуре  37 град. С в течение суток. Снимались показания о резистентности до и после инкубации.  На Рис.  3. показаны два графика до и через сутки аутогемолиза. Хорошо видно нарастание содержания слабых клеток.

 

Рис .3. Графики зависимости осмотической резистентности    эритроцитов от тоничности раствора NaCl: А – до аутогемолиза, Б – через сутки аутогемолиза. Слева вверху – процентное содержание групп клеток: сл. – слабые, ср. – средние, сн. – сильные субпопуляции клеток.

Глава 3. Свойства эритроцитов и их динамика в процессе жизнедеятельности.

Основные результаты исследования живых эритроцитов методами голографической микроинтерферометрии, телевизионной микроскопии и лазерной нефелометрии, сравнение с литературными данными привели к ряду открытий и обобщений, позволяющих пролить свет на неизвестные аспекты жизнедеятельности клеток, в результате чего возникает целостная картина жизни эритроцитов в кровеносном русле периферической крови. Можно выделить три основных момента:

  1. Модель изменений формы эритроцита. Форма клетки, как определяющий фактор его функциональной активности в кровотоке. Описание динамики изменений молодой клетки в русле крови вплоть до процесса утилизации старого эритроцита в селезёнке путем его сферулизации.
  2. Микроколебания мембраны эритроцита, ее значение для реологии.
  3. Неоднородность популяции эритроцитов в норме и патологии и ее значение для диагностики состояния организма

Модель изменений формы эритроцита.

Для описания модели достаточно выделить ряд утверждений, описанные в литературе и придать им связность:

  1. Эритроцит, безъядерная клетка, живущая за счет обмена с внешней средой, плазмой. У эритроцита нет репаративных, восстанавливающих мембрану механизмов. Любое повреждение мембраны смертельно для клетки, так же как для человека открытая рана.
  2. Внутренняя часть мембраны выстлана сократительным белком, спектрином, в виде сети. Ячеистая структура мембраны позволяет блокировать все нарушения, любой природы за счет сжатия поврежденной ячейки мембраны спектрином. Образующийся микропузырёк с гемоглобином отрывается и выделяется в плазму. Независимость от природы повреждающего агента подтверждается литературными данными: обнаружена связь спектрина с наружным слоем гликопротеинов, (иммунные реакции), с гликолитическими ферментами и с K/Na активируемой АТФ-азой, (системы поддержания независимой внутренней среды клетки). Связь с гемоглобином (20 %) обеспечивает корреляцию между колебанием масс гемоглобина внутри клетки, а так же обеспечивает переход от диска к сфере.
  3. Старение эритроцитов сопряжено с уменьшением диаметра клетки. Фрагментация мембраны – отщепление микропузырька в единичной зоне повреждения клетки (Чижевский отмечает 70-80 микровыростов на поверхности клетки) приводит к тому, что за жизненный цикл происходит в среднем 20-отщеплений микропузырьков что составляет 25-30% площади мембраны. При этом меняются геометрические параметры профиля клетки, изменяется объем и площадь поверхности, растет концентрация гемоглобина. Фрагментация мембраны носит приспособительный характер: при локальном повреждении мембраны происходит сжатие спектрина в ячейке сети с выбросом нарушенного участка клетки. Это приводит к уничтожению поврежденной зоны и к восстановлению целостности мембраны клетки. Ресурс этого механизма – 20 отщеплений, при этом происходит утолщение поперечного сечения клетки и облегчается сферуляция, переход от диска к сфере.
  4. Известна реакция сферуляции, перехода in vitro дискоцита в сфероцит. Наблюдаемый в ходе исследований переход от диска к сфере имеет ту же сократительную природу: сокращение все спектриновой сети приводит к образованию шара меньшей площади, объём меняется мало. «Лишняя площадь» диска исчезает при ошаривании за счет образования микропузырьков. Наблюдались переходы при механическом надавливании объектива на покровное стекло препарата. Переход происходил за доли секунды. Эта реакция обратима если не происходит отрыв микропузырьков и, носит необратимый характер при их отщеплении. Физиологическое значение сферуляции, ошаривания: старые или нарушенные патологией эритроциты попадая в щели сосудистой стенки кровотока селезенки (селезенка, единственный орган, где нарушена целостность сосудистого русла) подвергаются негативному воздействию повреждающих факторов, ошариваются, и тем самым, теряют возможность вернуться в сосудистое русло и утилизируются.

Суммируя вышесказанное можно представить такую модель: эритроцит в норме и при патологии может находится в двух состояниях, в состоянии покоя в депо крови, при низких нагрузках на организм и, в рабочем состоянии, находясь в постоянном потоке, в сосудах различного диаметра. Форма эритроцита меняется в течение жизни за счет потери поврежденных частиц мембраны, выделяемой в виде микропузырьков во внешнюю среду. Итак, сферуляция, универсальный тест на жизнеспособность, который не зависит от природы поражения эритроцита. Этот тест работает в селезенке для отбора и утилизации старых и ослабленных эритроцитов по схеме: слабая клетка – ошаривание – задержка в строме селезенки – клеточное переваривание эритроцитов. Роль фильтра, задерживающего ошаренные клетки выполняют щели в селезенке при входе/выходе эритроцита из/в кровяное русло.

Что касается отщепленного вместе с мембраной гемоглобина, он составляет свободный гемоглобин плазмы, который можно измерить. Таким образом свободный гемоглобин может служить тестом на активность скорость повреждения мембран эритроцитов.

2. Микроколебания мембраны эритроцита, ее значение для диагностики состояния клетки, для реологии крови в целом.

В отраженном лазерном свете, в опытах in vitro, хорошо наблюдалась картина интерференции между нижней и верхней поверхностями клетки, наблюдались колебания интерференционной картины с частотой в доли герца. Интерференционная картина передавала дискоидальную природу клетки, линии интерференции носили концентрический характер.

Продолжение исследований в данном направлении может привести к ряду следующих открытий: измерение частоты колебаний в норме и патологии, анализ формы интерференционной картины может быть новым диагностическим тестом состояния эритроцитов, плазмы крови и организма человека. Интуитивно понятно, что наличие колебаний поверхности диска может быть синхронизировано с потоком в русле крови, может влиять на реологические свойства эритроцитов, в том числе и на РАСПРЕДЕЛЕНИЕ эритроцитов в потоке крупных сосудов.

Заключение

Материалы экспериментов показали решающую роль изменений формы эритроцитов, за счет отщепления микропузырьков от его поверхности, для его жизнедеятельности от выхода ретикулоцита в периферический отдел системы крови до утилизации старой или ослабленной клетки. Показано физиологическое значение перехода сфероцита в дискоцит для задержки старой клетки в строме селезенки с последующей его утилизацией. Обнаружено наличие групп клеток по признакам и осмотической резистентности, как свойство популяции эритроцитов в норме и патологии. Обнаружены микроколебания мембраны эритроцитов, что может служить как диагностическим признаком, и, вполне возможно позволить пролить свет на реологические свойства эритроцита, а так же, объяснить процессы обмена клети: колебание мембраны, как перемешивание плазмы на поверхности наружной мембраны эритроцита.

Глава 4. Гипотеза о трансформации эритроцита в малый лимфоцит

Речь идет о единичном опыте на крови здорового человека. Венозная кровь на гепарине разводилась физиологическим раствором до распада монетных столбиков и образования плотного слоя одиночных клеток, нормоцитов. Увеличение х4000 (об. х100, ок. х40). Покровное стекло по периметру покрывалось иммерсионным маслом для предотвращения высыхания образца. Опыт длился около десяти часов. Начался он как обычно, с фотографирования интерференционного поля образца для набора статистических данных по норме. Вскоре появилось такое ощущение, что наблюдается некая упорядоченная картина «поведения эритоцитов» которая и наблюдалась длительное время. Если суммировать наблюдение, возникает следующая картина: вокруг одного эритроцита образовалась розетка из клеток, кольцо. Около этого кольца был отмечен малый лимфоцит (по размерам и по наличию ядра) Из этого лимфоцита выделилось во внешнюю среду яркое образование, размером около 1 мкм и внедрилось в центральный эритроцит. Через несколько часов произошла трансформация эритроцита в малый лимфоцит, ядерную клетку шарообразной формы. Напомню время процесса, около десяти часов.

Будучи в трезвом уме и здравой памяти не поверил тому, что увидел, потому, что «так не может быть». Сейчас я считаю своим долгом описать этот процесс, так как я его понимаю: происходит деление ядра лимфоцита без образования двух клеток, одно ядро выделяется наружу (пиноцитоз) и внедряется в эритроцит, находящийся в центре розетки других клеток, ядро используя гемоглобин эритроцита, формирует все элементы ядерной клетки. Явление розеткообразования эритроцитов показано на сухих мазках.

В данном случае вероятно стимулирование лазерным светом данного процесса, так как, в литературе есть материалы о стимуляции гелий-неоновым лазером иммунных реакций in vivo.

Приложение 1.

«ЛЕОНАРДО ДА ВИНЧИ ХХ ВЕКА». Юбилейная сессия Российской академии естественных наук

В феврале 1997 года в стенах Московского государственного университета имени М. В. Ломоносова прошла Юбилейная сессия Российской академии естественных наук в связи с десятилетием организации. Один день был посвящен 100 летнему юбилею А. Л. Чижевского. Пленарное заседание прошло в Главном Здании МГУ. Секционные заседания — в аудиториях геологического, географического и механико-математического факультетов.

По итогам сессии опубликованы ее материалы «ЛЕОНАРДО ДА ВИНЧИ ХХ ВЕКА». http://чижевский.рф/леонардо-да-винчи-хх-века-юбилейная-с/

Ниже публикуется текст, подготовленный для выступления, текст дополнен иллюстрациями и правками для облегчения понимания материала.1997-2022гг

ДИНАМИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЖИВЫХ ЭРИТРОЦИТОВ

А.Н. Метелкин

Роль А.Л.Чижевского в постановке проблем изучения красной крови до конца не осмыслена и не все его идей реализованы и проверены. При работе с его книгами возникает ощущение колоссальной силы интеллекта, способного не только самостоятельно решать проблемы, но, что для нас самое главное, наводит внимательного читателя на новые оригинальные мысли и идей. Это “наведение идей”, вызванное прочтением его работ, сначала поражает своей силой, а потом требует от добросовестного и честного ученого развития этих идей, внутреннего спора с автором, а затем и конструирования цепочки исследований- доказательств истинности новых, свежих положений и фактов.

В семидесятых – восьмидесятых годах в Москве во ВНИИ оптико-физических измерений проводились медико-биологические исследования живых нефиксированных эритроцитов. Целью исследования являлась разработка методов диагностики и аппаратуры на основе методов лазерной техники и компьютерного анализа. Были выполнены научно-исследовательские работы в ходе которых проверялись возможности таких оптико-физических методов, как: голографическая микроинтерферометрия эритроцитов, лазерная нефелометрия, Фурье-микроскопия, лазерная телевизионная микроскопия. К этой работе были подключены ведущие институты страны кроме ВНИИОФИ в ней участвовали: Физический институт Академии Наук, Институт Атомной энергии им Курчатова, Московский институт электронного машиностроения, а со стороны медиков- 2-ой МОЛГМИ и ЦОЛИПК и другие институты.

Рис 1. Фазовая картина поверхности живого эритроцита с микропузырьками на поверхности. Картина получена в Институте Атомной энергии им Курчатова, в лаборатории Александра Петрова на основе обработки интерферограммы живой клетки.

Голографическая микроинтерферометрия эритроцитов. Преимущества.

Метод количественной диагностики эритроцитов на основе голографической микроинтерферометрии позволяет исследовать ЖИВЫЕ клетки крови БЕЗ ОБРАБОТКИ одновременно по многим параметрам (3) .Сравнительный анализ нового метода с традиционной световой и электронной микроскопией указал на дополнительные возможности микроинтерферометрии: количественная оценка поперечного сечения клетки, площади поверхности и объема эритроцита, сухого веса и концентрации гемоглобина.

При разработке голографического интерференционного микро­скопа выбор путей исследования определила книга А.Л.Чижевского (1)”Структурный анализ движущейся крови” в которой особое внимание обращается на изучение формы и профиля эритроцитов. Автор при минимальной аппаратурной базе смог максимально расширить представления о важности и научной ценности количественной оценки этой “простой” безъядерной клетки.

Живая клетка в физиологическом растворе при ее освещении проходящим и отраженным светом с точки зрения физической оптики является в основном фазовым объектом. Фазовое возмущение, вносимое клеткой в световую волну может быть количественно связано с геометрическими параметрами и концентрацией внутриклеточного содержимого на основе принципов интерферометрии.

Динамические характеристики живых эритроцитов.

Под динамическими характеристиками эритроцитов нами понимается: изменение формы профиля поперечного сечения клеток, их объема и площади поверхности, явление фрагментации мембраны с отщеплением микропузырьков и переход диск – сфера. Эти характеристики, динамические в том смысле, что являются ответными реакциями клетки на изменяющиеся условия внешней среды (плазмы и организма в целом ). Они могут протекать и очень быстро – за доли секунды при переходе от диска к сфере и очень медленно – возрастные изменения профиля сечения клетки.

Анализ ответных реакций живой клетки (динамических характеристик) в количественном виде может быть источником принципиально новой информации о состоянии организма человека и окружающей среды.

В данной работе было проведено изучение ответных реакций эритроцитов in vivo и in vitro на изменяющиеся условия внешней среды (плазмы крови и организма в целом). Были проанализированы следующие процессы в количественном виде: изменение формы профиля поперечного сечения клеток, их объема и площади поверхности, явление фрагментации мембраны с отщеплением микропузырьков и переход от дискоидальной формы клетки к сфере.

В обследованных группах больных с обменными патологиями (диффузный гломерулонефрит и сахарный диабет) и с нарушением цитомембраны (наследственный сфероцитоз) выявлено, как достоверное различие средних показателей, так и единообразие характера возрастных изменений в норме и при патологии. Это указывает на наличие единого механизма изменения формы дискоцитов для нормы и патологии вне зависимости от природы воздействующего фактора.

Сравнительный анализ литературных данных и полученных результатов показал, что в основе изменений эритроцитов в организме: их формы и размеров, их массы и концентрации гемоглобина лежит процесс фрагментации поверхности эритроцитов с отщеплением микро-пузырьков, содержащих гемоглобин в меньшей концентрации, чем в эритроците. Расчеты показывают, что в процессе жизнедеятельности у эритроцита происходит от 20 до 30 отщеплений микропузырьков и при этом для клетки значительно облегчается переход от диска к сфере.

Таким образом эритроцит имеет две взаимосвязанные и разнесенные во времени реакции локальную (фрагментация мембраны) и интегральную (переход от диска к сфере). Фрагментирование мембраны с ее отщеплением в виде микропузырьков для эритроцитов является физиологической приспособительной реакцией в ответ на локальное, внешнее или внутренне воздействие в конкретной точке мембраны. Известно, что актомиозиноподобный сократительный белок – спектрин, выстилающий внутреннюю поверхность мембраны эритроцита имеет контакты с основными ферментными системами клетки, с иммунными молекулами и с гемоглобином. Локальное нарушение целостности мембраны (ее барьерной функции) губительно для клетки и может быть устранено путем отделения части поверхности путем отшнуровывания в виде микропузырьков с поврежденным участком.

Переход от диска к сфере является общим интегральным ответом клетки на значительные изменения и может проходить скачком, иметь, как обратимый, так и необратимый характер. При этом площадь поверхности клетки резко уменьшается за счет образования микропузырьков и, если они отрываются, то эритроцит необратимо принимает форму сферы. Объем клетки мало изменяется, что говорит не о простом набухании клетки, а о ее “схлопывании” в сферу без увеличения объема.

Сравнение полученных результатов с литературными данными по физиологии эритроцитов указывает на то, что переход диск-сфера может выступать как единый механизм удержания ослабленных (наследственный сфероцитоз) или старых эритроцитов в селезенке с последующей их утилизацией. Вне зависимости от вида патологии эритроциты удерживаются внутри селезенки при их сферуляции из-за наличия в этом органе повреждающих факторов. Молодые и взрослые эритроциты проходят через этот фильтр без сферуляции из-за большей устойчивости к повреждающим факторам. Таким образом, реакция эритроцитов – переход от диска к сфере при наличии повреждающих факторов различной природы (иммунных, физико-химических и других) может служить простым и надежным маркером для отбора и утилизации слабых клеток например в селезенке.

Может быть выстроена определенная цепь событий, определяющая развитие и утилизацию эритроцита: молодой эритроцит – потеря микропузырьков в сосудистом русле и селезенке, как приспособительная реакция клетки на повреждения, зрелый эритроцит – изменение профиля клетки ее утолщение и повышение концентрации гемоглобина, и как следствие общего старения и изменения профиля на менее гибкий – облегченный переход от диска к сфере – сферуляции в селезенке и задержка старого или больного эритроцита и его утилизация.

Развитие идей А.Л.Чижевского о важности изучения формы живых эритроцитов, как главной приспособительной характеристики динамично изменяющейся клетки привело нас к вышеописанным обобщениям, ко­торые могут иметь свое развитие в различных фундаментальных и прикладных областях медицины и экологии. исследования этой интереснейшей по информативности клетки крови.

Мы глубоко убеждены, что живой эритроцит – эта чисто обменная, безъядерная клетка может служить хорошим тест-объектом для диагностики на двух уровнях: во-первых при изучении патогенеза различных заболеваний и для контроля терапии и, во-вторых при биотестировании на клеточном уровне бологически-активных сред, полей и излучений.

1. А.Л.Чижевский. Структурный анализ движущейся крови. М. 1959

2. А.Л.Чижевский. Биофизические механизмы реакции оседания эритроцитов.

Новосибирск. Наука. 1980 177с

3. А.Н.Метелкин, В.Н.Манин, А.Г.Румянцев. Анализ формы и размеров эритроцитов при наследственном микросфероцитозе и у здоровых детей методом голографическоймикроинтерферометрии. -“Педиатрия”, 1980, 5, с. 43-45.

4. Б.М.Степанов, Ю.Е.Вельтищев, А.Н.Метелкин, Ю.Е.Князев, В.Н.Манин, А.Г.Румянцев. Возможности использования оптической голографии в клинических исследованиях. «Советская медицина”, т.5, 1983

Summary: The paper demonstrates that holography methods can be used in cy-

tomorphological reseach for quantitative assessment of non-fixed living red cells.

These methods widen the possilities of optic mikroscopy, permitting the physi-

cians to make their studies more objective with the help of more precise quan-

titative criteria to evaluate the state of cells.

Метелкин Александр Николаевич – кандидат биологических наук, старший

научный сотрудник по специальности «биофизика». Область исследований: разработка аппаратуры и методик для медико-биологических методик диагностики живых клеток крови на основе лазерной и вычислительной техники.

Место работы: с 1971 по 1986г – ВНИИ оптико-физических измерений,

с 1986 по 1990 – заведующий проблемной гематологической лабораторией КБ 6, 3ГУ,

с 1990 по 1997 – директор ООО “Медицинский центр ЭРИТРОН”

с 1992 по 1995 – старший преподаватель кафедры биофизики Московской Ветеринарной Академии.

Подборка стихов. Александр Метелкин 11.01.2022

Веселье жить неистребимо…

(Подборка стихов. 90гг по н.в.)

А.Метелкин

 

Вступление

Вступление 1. Моим  друзьям.

Стихи специально я не пишу, они появляются сами,  вдруг что-то происходит и стихотворение ложится на бумагу, в любое время года, дня и места. Выкладываю в сети и … забываю. Этой зимой собрал по разным местам свои стихи, выбросил, что смог, что смог, оставил… Показывал стихи серьезным поэтам, сказали, да, кое-что годится, неплохо…

Вступление 2. Лирическое.

Пишу, ну как дышу: открыл у души задвижку, прикрыл вьюшку, растопил, как печку и пошли строчки, с кочки на кочку, с кочки на кочку, прыг, прыг, прыг. .. Шлю вам друзья свою любовь, и свой привет, все будет хорошо, все будет хорошо, ведь смерти нет, а наша вечная Душа, без Бога, ведь она, не стоит и гроша… всё, угли прогорели, пора закрывать поддувало и залезать опять под одеяло… ранее утро…

Деревня Бутьково. 6 утра 14 ноября 2020.

Мягкий юмор

О музыке, кто может так сказать?

Дебюсси, Равель, Сен-Санс,

Брамс, Брамс, Брамс!

90гг

***

Три индейца за вигвамом…

Три индейца за вигвамом

Пили огненную воду…

Да! – Сказал Бизон могучий –

Не бывает водки круче!

Лучше водки, чем “Кристалл”

Я, команчи не видал!

Все же можно возразить

И “Исток” неплохо пить!

Монтигомо возразил,

И, по маленькой налил!

Третий, самый молодой,

Только крутит головой:

Что “Исток”, что “Кристалл”,

Для него один финал –

Выпил малость и… упал!

Три индейца за вигвамом

Спят в траве, лицом в природу,

Завтра снова бледнолицый

Привезет им эту воду!

2001г

Лето в деревне

Откушав чаю с молоком,

Таперча посудачим:

“Жара, июнь!

Июнь, жара…

А как же тут иначе?”

Встал в шесть,

Полол гряду,

В теплице

Проверял…

Арбузы..

Ниччо,

Растут…

Напился чаю вот,

От пуза…

Сижу пишу…

Я с клавой иногда дружу…

Ндаааа, жисть,

Трудна,

Кругом

Стагнация,

Страна почти што,

Вся уж полегла…

Заводы фабрики,

Деревня… жуть….

От этой мысли,

Не заснуть….

Канешна жисть у нас тоска,

Не то что город буйный:

Машины, вонь,

Гремит метро,

И надо,

Надо,

Надо…

А тут: в тиши живём,

Чай пьем,

И нам ниччо,

Не надо!

….

Народ нищает по ТВ,

Выходит, на протесты,

Народу, куча,

До фига…

А мы, сидим

На месте…

..

Тепло светло,

И мухи нас кусают.

Орут истошно,

Соловьи,

Собаки дружно лают…

Кричит петух,

Ворчит старух,

Ей снова, чёй то

Не хватает,

Болит спина,

В руках

Прострел,

А этот маленький

Пострел,

Куда то

Улизнуть успел…

Алееееешаааа…

Вот щщас крапивой,

Да по ж….

….

Сидим в земле,

И ничьего,

Нам лишнего

Не надо…

Картошка,

Щи и огурец!

Вот жизни

Всей отрада…

Живем “как все”

Как все умрем,

И ляжем за ограду,

Но это завтра,

А пока…

Нам лишнего

Не надо…

Биосферная усадьба Бутьковщина

21 июня 2019гг

Гринписец с гринпиской…

Гринписец с гринпиской по саду гулял,

Гринписец гринписку на путь наставлял:

“Кругом все живое – все надо беречь!”

Текла как ручей его умная речь.

Гринписка гринписцу с любовью внимала,

Задачу свою она так понимала:

“Могла бы родить ему я гринписяток!

Хотя бы и тройку, а можно с десяток!

Веселых и умных и дружных ребяток!

Они бы продолжили папино дело –

Спасали б планету от гибели смело!

А он бы гордился и нянчил внучат,

Устав от похвал и различных наград.”

Но тут на гринписку наехал комар!

Он кровь ее нежную грубо глотал!

Глотал и давился, но вот ведь подлец!

Комар не увидел свой близкий конец.

Он кровь у гринписки настырно сосал,

И слушать гринписке гринписца мешал!

Гринписка лишь ручкой слегка повела –

И нету на свете того комара!

Лишь капелька крови на шее горит –

Комар не мешает – пусть друг говорит.

Гринписец летая в своих эмпиреях,

Узрел лишь убийство на девичьей шее.

“О ужас! О ужас! Коварство и кровь!

Какая ж меж нами возможна любовь?

Когда пролилась тут невинная кровь!

Комар ведь не ведает, что он творит,

В нем только инстинкт лишь простой говорит.

Он род свой продолжить пытался и вот:

Комар сей на свете уже не живет!

Гринписец и дальше б хотел говорить,

Но страшный конец оборвал его нить…

Девица с рыданьем бежала из сада –

Детей уж не будет – такая досада!

Гринписик малыш и гринписочка дочка,

Бежали из садика с воплями прочь –

Никто им на свете не сможет помочь,

Не будет на свете таких гринписяток –

Никто не наделает дружных ребяток!

***

Эпилог

Давно та девица с другим уж гуляет…

Как рокер на жутком «харлее» гоняет!

Бензином и маслом от куртки воняет

А деток рожать, ну совсем не желает…

1995..

Гуляя по лугу увидел стаю ворон…

– Эй! Куда же вы вороны?

– Мы спешим на похороны,

Похороны хомяка,

Мы торопимся, пока!

– А зачем же вам вороны,

Так спешить на похороны?

– Понимаешь – все вороны,

Обожают похороны,

И к тому же сам хомяк,

Очень вкусен на тощак!

И улетели!

лето 2001г.

Я себя любимого…

Я себя любимого крепко обнимаю,

Я – себя любимого к сердцу прижимаю,

Я, себе любимому все шепчу на ушко:

Я такая лапушка, я такая душка

Я себя любимого холю и лелею,

Я себя любимого – регулярно брею,

А на морду, бритую – лью одеколон –

У меня любимого жизнь, – как сладкий сон!

Я себе любимому наливаю квасу,

Наливаю квасу к яблочному спасу,

К яблочному спасу, а еще на троицу,

За меня любимого молит богородица!

Предо мной открылася светлая дорога,

Потому что братцы я – частица бога!

Я любовью светлою путь свой освещаю,

Потому-то в милом мне я души не чаю!

Я себе любимому все грехи прощаю,

Я себе с баранкою чаю наливаю,

Наливаю чаю мне, чаю с коньячечком!

У меня любимого заалели щечки!

Заалели щечки, шея вся зарделась,

Что бы мне по жизни пелось и хотелось,

Что бы мне хотелось самой вкусной сдобы

Самой мягкой сдобы, а еще колбаски,

Что бы круглогодилась этой жизни Сказка!

2002

***

Духота кругом ужасная,

Воются струи обжигая,

Моя плоть совсем нагая,

От жары изнемогает!

Я лежу под вентилятором,

Представляюсь гладиатором,

С черепом насквозь пробитым,

Потным, тощим, и небритым!

Разнесли уж всех патрициев,

По дворцам рабы мордатые,

И паршивые плебеи,

Расползлись все крепко датые!

Сняли тоги уж сенаторы,

Перед сном умыли ноги,

И солдаты, по традиции,

Голышом, без амуниции,

По свистку легли на нары…

Я лежу под вентилятором,

Представляюсь гладиатором,

На арене позабытым,

Тощим. грязным, недобитым…

Июль 2001г

Из СССР…

Ну разве это стихи?

Все ха ха, да хи хи-хи…

Маша ела кашу, ей попало что-то в глаз, это раз!

Мама мыла раму, думала про папу, часа полтора, это два!

Папа спал на совещании, на партийном на собрании,

Где бранили капитал, а папа – спал!!

Нет порядка в этом мире, это три и все четыре!

2017

0 1 двоичный код

Двоичный код придумала Природа,

Разбив на пары Бытие

Зверья и человеческого рода!

Ирония

Когда работа не в радость…

Рука мышой водить устала,

От стула задница трещит,

А от начальника орала,

Винищем за версту разит!

Тут все, как в сумеречном сне,

Боятся люди здесь успеха,

И не блеснет тут лат доспеха,

И не всхрапнет здесь конь во тьме!

Стишки коротышки-сюрчики

Я, крик вороны той печальной,

Что бороздит пустыню неба,

Что бы добыть в помойке грязной

Кусочек черненького хлеба…

Я –звон разбитого бокала,

Который на пол уронила,

Рука какого-то дебила…

Два глаза плавали в стакане,

С тоской ловили взгляд твой томный,

А я забытый и безмолвный,

Лежал, как ключ в чужом кармане!

В нашей гавани все тип-топ…

Меня пригласили друзья на запись передачи в Останкино. Передача, «Наша гавань». Ведущие Эдуард Успенский и Элеонора Филина. Кстати. Тут со мной произошел странный случай, мы шли группой, и я поспорил с приятелем, что ко мне во время передачи подойдет ведущий и заговорит со мной…

Так и получилось… На вопрос Успенского: “Как Вам тут у нас?” Я растерялся и, неожиданно для себя ответил, что мне – все «по барабану» имея в виду, что в стране полный облом, а тут у них классно … Позже выяснилось, что это был прямой эфир.

Кармическою силою судьбы

Я был заброшен в странный балаганчик,

Там прыгал на свету веселый зайчик,

И филин ухал радостно в углу!

В нашей гавани все тип-топ,

Эд Успенский тут – главный коп:

“Здравствуйте, здравствуйте, здравствуйте…”

Публика, привыкшая к хлысту,

Радостно, под музыку, кивает!

Эдуард Успенский – царь и шут,

Солнечные зайчики пускает…

Он чертовски ловок и остер,

Он раскован и привычен к свету,

Для евойной шутки тут простор!

Он любого призовет к ответу:

“Ну, вот Вы! Как Вас зовут?

Что это Вы так разулыбались?

Может, Вы хотите, что сказать?

Или мне все это показалось?

Что Вам так понравилось у нас?

Что это Вы так разулыбались?”

Я ответил вежливо ему,

Я ответил, как свому другану:

“Понимаешь, парень, я – живу!

Остальное – все по барабану!”

Парень, как-то сник и приуныл:

“Ну и напустил ты тут туману,

В толк себе я братец не возьму,

Что тебе у нас «по барабану»?”

Отвечаю ласково ему,

Отвечаю просто, без обману:

«Жизнь прекрасна только в нас!

Остальное – все «по барабану!»

Эд плечами вежливо пожал.

Мол: попался странный экземплярчик,

Отскочил вдруг к сцене и сказал:

“Будешь тут теперь ты – барабанщик!»

Послесловие.

Рабочий момент съемок. Элеонора Филина: “Прекратите запись, у меня от смеха потекли слезы и смазалась краска”…

1999г

***

Любить людей…

Я где-то братцы прочитал:

“Любить людей – такая радость,

Ты любишь их, они – тебя,

И все вокруг – одна семья!”

Попробовал так сделать я.

С утра себя я превозмог

И стал любить, пока не взмок!

Был целый день весьма учтив,

И очень, очень терпелив:

Начальник гадость, я – привет,

Ни слова грубого в ответ…

До вечера я так старался.

Пришел домой и отыгрался:

Сперва с женою поругался,

Потом с сынком,

Потом уж с братом –

Его послал отборным матом…

Потом я залудил стакан,

Поел и ахнул на диван.

Любить людей такая гадость

Уж лучше сразу пить мочу!

Но я не пил и промолчу.

А вы говорите!

90гг

***

Монолог пьяного в вагоне метро,

который он ошибочно принимал за диалог…

Стою к нему боком,

Читаю книгу…

Он хочет!

Он очень хочет поговорить,

А потом и набить морду,

Он очень этого хочет,

Но стоит неровно…

-Ты ччче морду-то воротишь?

Ааа!?

Я может с тобой

Говорить хочу!

Ну, тты!

Понял?

– … (А в ответ тишина…)

– Нет, Я ття спрашшваю, икк:

Ты – понял?

– …

Аааа…

Нну-ну…

Я и говорю,

что ты козел!

Куда пошел?!

Куда пп-пошшел?

– … читаю книгу

– Нет – ты погоди,

Нет – ты постой,

Когда с тобой

Я говорю.

Не то, я рожу то твою,

От рта до уха,

Раскрою!

 

Вот и поговорили.

 

“Станция – Таганская”

Мне выходить.

2002

Лирика

Я стихи не умею писать,

Знаю я, что не быть мне поэтом,

Но приходят мне вдруг, ни откуда слова,

И пишу я о том, и об этом…

***

Я был на Тихом океане,

Там нерпы мудрые живут,

Они не сеют и не жнут,

А тихо плавают в тумане…

***

Сахалин. Тяжелый горный маршрут

Как будто вечность в плен взяла,

И нет конца пути, тут каждый шаг – рывок,

И ноги вязнут, жжет песок, и воздух сушит вдох,

Я не могу нести рюкзак, идти так тяжело!

И снова шаг и снова шаг, еще рывок, еще…

 

…Я плавно падал на песок, стекал сам с плеч рюкзак,

Когда командовал: «Привал!», мой лучший друг Иван!

Гудели плечи, пот стекал и разъедал глаза…

И стразу праздник наступал, про все на свете позабыв,

Как малое дитя, во все глаза, во все глаза, глядел на океан!

 

Он синим был, зеленым был, ласкался пеною у скал,

И птица черная баклан, любила океан!

Глядел, как пьют вино: глоток, глоток, еще, еще…

И пить, и пить, и пить – не уставал!

На нерпьих мордочках усатых, черничными бусинками глаз,

Глядел могучий океан, на нас, на нас, на нас…

И улыбался Он, гостям был рад.

 

Гудели плечи, пот стекал, и, мокрый черный комбинезон,

К спине все приставал… А я глядел на океан:

На скалы, воду, птиц, на облака и воздух-чист:

Какая Мира красота, в блаженном сердце разлилась!

И вдруг в душе моей – открылся океан!

Я слился с миром! Ликовал! На пир позвал друзей!

И не был, так тяжел рюкзак, зачем я здесь, я знал!

 

30 мая 2008г.

***

Посвящается моему другу:

лорду, барону и пэру

маркизу виконту и сэру,

эсквайру, майору и графу,

и очень хорошему шкафу,

где много вещиц хранится,

которые могут сгодиться,

ландграфу и князю, и папе,

епископу в розовой шляпе,

собаке и мошке,

а также, моей

замечательной

кошке!

***

Мне не видать восторженной толпы!

Мне не слыхать их громких криков: «Браво!”

Мне не грозит писательская слава.

В тиши лесов слагая вирши,

Их не несу на суд толпы,

А просто, опускаю в Лету.

Река забвенья, Интернет,

Все примет на исходе лет…

2000- 2018.

***

Среда, июль шестнадцатого года…

А за окном волшебная погода!

Окно открыто в лето… ветерок… закат,

Березы ветви так шуршат…

Раскрылась вдруг моя душа,

Открылась настежь, нараспашку!

И, туча древнего зверья рванулась…

Бежит, летит, стрекочет, воет…

-Когда он душу так раскроет?

-Бегите все в поля, в леса,

Там жизни свет, и там – краса…

Всё стихло… тихо, а в душе – свобода….

Среда, июль, шестнадцатого года….

2016

***

Из дивных раковин пальто,

Глядели женщины лукаво!

И их глаза, как крики “браво”!

Пьянили кровь! А губы нежно,

Мне, шептали – “про любовь”!

Очнулся, станция метро,

Моя. На выход, “сэр”!

У Вас работа, жена,

И множество забот…

Ах! Женщины!

Кто вас поймет?

9 декабря 2002г.

***

Внимала женщина мужчине!

И смысла слов не разбирая,

Враз, в каждом звуке утопая,

Ему судьбу свою вверяла!

Глаза пронзительно смотрели,

Как будто прокричать хотели:

“Вчера закончились метели!

Дай руку, друг мой, полетели!”

Да! В каждом звуке утопая,

Цвела Любовь в начале мая,

И он, вниманьем упоен,

Ей объяснял… про позитрон.

90гг

***

Когда я выйду из себя….

Когда я выйду из себя,

И тело передам земле,

Я душу буйную мою,

Тот час, немедля, успокою…

И буду спасть, да! Просто спать,

А не отсчитывать минуты:

«Пора вставать, пора вставать…»

Мои любимые друзья,

Те, с кем делили мы заботы,

Устав от сделанной работы,

Придут ко мне,

И вот тогда, и вот, тогда

Начнётся мой – «разбор полётов» ….

Ну а пока, ну, а пока,

Я – всё валяю дурака….

6 февраля 2018г.

***

Если выпить все лето до дна,

То за летом потянется осень,

А за ней и белёсая проседь…

Морок стылых дождей…

Не спеши мой дружок,

Лучше сядь отдохни,

Под березой, в прохладной тени,

Посидим помолчим,

Просто так, без причин…

2021

***

Милорд! Вы – не правы!

У нас еще есть в запасе

И порох, и пули, и хватка!

Еще предстоит в финале –

Самая жуткая схватка!

90гг

***

Мне сегодня драться на дуэли,

Я не смог обидчика простить,

Так мне все до черта надоели,

Что сегодня точно – брошу пить!

Выпью я последних полстакана,

Расплачусь с трактирщиком сполна,

Попрощаюсь с леди своего романа,

И пойду пристукну наглеца!

2002

***

О России

Куда идти, куда податься?

Кому-то хочется подраться…

1.

Давно это было:

Когда всех перебило –

Новая власть страну захватила…

Виделось яйцо золотое –

А получилось – худое…

2.

У нас же было государство –

Рассейское, былое царство…

Там жили старик со старухой

И была у них курочка Ряба …

Но тут пришли большевики,

И Русь поставили в штыки.

Владимир Ильич – бросил клич:

“Буржуя хватил паралич!

Мир хижинам – Война дворцам!

Вся всласть Советам!

То есть – нам!”

И пошли за ротой роты –

Под пулеметы,

Под пулеметы…

Петька и Анка,

Корнилов и Врангель…

Белые, красные и зеленые –

Брат на брата,

Сын на отца:

Дрались до победного, до конца,

До кровавого до пота,

За ротою рота,

За ротою рота…

Бляха муха – цокотуха –

Развороченное брюхо,

Всех скосила Смерть-старуха!

А кругом – одна разруха!

“Будем строить, будем жить –

Будем Ленина любить!”

3.

Нет человека – нет проблем!

Былая формула успеха…

Устав от плясок на крови,

Теперь России – не до смеха!

4.

Куда же удаль ты свою

Страна-голуба растеряла

Зачем же лучших сыновей

По белу свету раскидала?

А смелых вовсе расстреляла!

Теперь кряхти, теперь ругайся…

5.

Не президент и не народ,

Не какой-то нищий сброд,

Не бандиты и не воры,

Россией правят – мародеры:

“Ты написай мне в глаза –

Скажу – Божия роса!

Мне что по лбу,

Что мне в лоб! –

Да после нас,

Да хоть потоп!

Ух-ты, ах-ты!

Все мы космонавты!

Кто смел тот – съел!

Ну а ты брат не успел!

Ух-ты, ах-ты!

Все мы космонавты!”

6.

Справляют нынче мародеры

Свой пир!

И ты на том пиру

Стоишь, как нищая старуха –

Вся на ветру!

Вся на ветру!

7.

И реки не повернуть вспять,

И “наших” – мертвых

Нельзя поднять…

И все же, Родина у нас есть

Она – Россия – мать и честь!

Одна!

И никому мы не нужны

Там!

И нужно выкинуть хлам –

Здесь!

Весь!

Нам!

2000-2002гг

Философская лирика

Растет ощущение, что человек

далеко ушел от Создателя

и приближается к своему концу…

Лес – это Храм,

Река – Купель,

Дорога – Путь

К подножью Бога,

Так почему же,

Почему,

В душе моей

Растет тревога?

90гг

Вот что происходит в самоизоляции…

Ваше Высочество!

Я убил в себе Одиночество!

Убил, как смог,

Нас двое:

Я и Бог…

***

Исповедь.

(Поиски смысла в православии)

Мой отец, любящий горячо!

Вот проходит моя жизнь и вижу:

Много я претерпел ударов судьбы,

Но не сломался.

Ненавидел и перестал ненавидеть,

Не прощал обид и простил их –

Все пустое пред Великим Переходом!

Меня били, но я не плакал!

И глаза мои всегда были сухими,

И выжгла эта сушь Любовь мою,

Но не погасила Веру в звезду мою!

У меня отняли плоды трудов моих,

А я начал писать стихи.

Не умел плакать, но научился смеяться,

Научился смеяться – стал радоваться жизни!

О, господи! Что мне толку от знания моего,

Если я молю тебя и не слышу ответа твоего!

Я глух, а ты всемогущ!

О, Господи!

Ты пребываешь в вечности, я в смертном теле!

Ты знаешь Законы, я их нарушаю!

Скорбишь обо мне, но глух я и слеп.

Я смертен, но чувствую:

Есть сила во мне, есть!

Научи Господи, как победить в себе силы темные

Дай мне Свет свой и Любовь свою

Хочу слышать тебя, о Господи!

Хочу радоваться Земной Жизни,

И видеть вокруг счастливого лица близких!

Аминь!

90гг

 

Молитва

Отец! Все вокруг сотворено тобою для блага моего:

И солнце, и травинка, и птица, и рыба, и зверь.

И все призвано служить на радость мне,

Я же вовлечен в процесс разрушения

Творений твоих прекрасных,

В доме моем – мертвые вещи,

И прямые углы!

О, Господи!

Отец мой небесный!

Яви, наконец, волю свою

И укажи путь –

Что делать:

Здесь и сейчас

Отец!

Я, сын твой

Идущий к тебе!

Аминь!

90гг

***

Письмо сыну

Не спится, сын, не спиться, я вынужден крепиться,

Какой бы ни был нынче сплин, мне – семьдесят один,

Когда мне было пятьдесят, я был горазд поспать,

Что держит в этом мире?

Только Бог,

Иначе б я сказать не мог,

Лишь только Бог назначит мне порог,

Когда уставши от дорог, я улизну, исчезну вмиг,

Оставив тело, тот старик уже не мой никак, ну как-то так…

И этим кончу свой рассказ, его чарующая нить порвётся вдруг…

Что сделал и чего постиг, увижу в этот чудный миг…

Что жизнь прекрасна, как Весна, и вспомню ночи я без сна…,

Я чаял радость, пил утраты, ну чем богаты, тем и рады…

И смерть друзей, рожденье новой жизни, так мир устроен,

Внутри обыденного мира, не сотвори себе кумира,

Есть мир иной…

“Там волны с блесками и всплесками не прекращаемого танца,

И там летит скачками резкими корабль Летучего Голландца”

Так написал один Поэт, давно, давно уж много лет прошло…

Пора мне подводить итоги, и вижу светлые дороги,

Что там? Что завтра будет: новый день, и новый бой за жизнь,

И смерть не смеет мне перечить, пока жива моя строка…

Я продолжаю мой рассказ, об этом мире человечьем,

Куда идем, куда бежим, не знаем мы, а новым мир уж настает,

И в этот час неверный я вижу мир, он будет… биосферный.

Закончив старый тварный век, возникнет Новый Человек!

Он жив, он просто спит, и видит сны,

Как пробуждается Земля, как жить и знать: живешь не зря!

Что делать? Душу пробудить от летаргического сна,

Открыть сердца навстречу Богу, и резко изменить дорогу,

Уйти из душных городов, где жизни нет, уйти навеки,

Бегите, други – человеки…

В леса, долины, где тиха, спокойная река ласкает нежно берега,

Где птицы, воздух и рассвет, где шума нет и нет лопат,

Которых дворники несут, на Страшный Суд, гремя по утру ..

Есть у меня – просторный дом, и лес шумит, он сразу, за моим окном,

Синицы, поползни и дятлы, и снегири, и свиристели, зовут, зовут

Уж новые метели, пора, замерзшая земля давно уж просит покрывало,

Сменяет осень зимний день, гонять на лыжах, мне не лень…

Наскучит бег сижу в Сети, прилично ловит Интернет, антенна,

Пишу, звоню, сливаю фото, кругом друзья мои сидят,

За сотни верст, но мы – едины, мы видим Свет, и Новый День,

Он настает, закончен старый, тварный век,

Он закрывает тихо дверь,

Ты мне поверь,

Глаза открой,

Иди!

В дорогу!

Бог с тобой!

2020

***

Жёсткое православие…

Не привык молиться чужим богам,

Своего никому не отдам,

Он, мой православный Бог, жесток,

Для лентяев, трусов и лежебок!

Он требует: забудь себя,

Уничтожь,

Эта тварная жизнь, есть ложь!

Он прав,

Не от мира сего,

Придет рассвет!

Так он сказал,

Это, его Завет.

Внутренний человек,

Жизнь,

Ветхое тело,

Смерть.

Хочу есть пить,

Высокую зарплату,

Веселую жисть..

Жесть!

Как быть?

Заново себя лепить!

Из самости и подлости,

Из гадости и гордости,

Все это в себе убить.

Жить!

Где то 2020…